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尾静注での肺塞栓予防について トピック削除
No.5581-TOPIC - 2016/11/28 (月) 19:21:33 - 初心者
 現在マウス(C57BL/6)にマウス大腸癌細胞CMT93を1~3×10^5個を尾静注して、肺転移モデルを作成しようと実験しております。初めのうちは尾静注がうまくいかなかったのですが、練習を重ね要領を得てきました。しかし最近、尾静注の際にまったく無抵抗でキレイに注入できた場合には肺塞栓を起こして(?)マウスがすぐに死んでしまい、困っております。希釈時にはピペッティングを行い、文献を参照するとtail vein injectionで細胞数もほぼ同等であるものが多いのですが、同様の実験を行っている方がいらっしゃいましたら肺塞栓を起こさない工夫等につきましてご教授いただけましたら幸いです。
 
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No.5581-4 - 2016/11/30 (水) 03:48:24 - てれ
いくつかの癌細胞で肺塞栓モデルを作成していました。お二方のおっしゃるように細胞のアグリゲーションが一番の問題だと思います。アグりやすい細胞株の場合はシリンジで細胞塊を崩してから注射していました。

手技の面では気休めかもしれませんがゆっくり注射するぐらいでしょう。
emaさんのおっしゃる通り眼窩静脈叢からも静注は可能ですが、眼窩に残った癌細胞が生着・増殖することもありますので私はあまりオススメできません。また、癌細胞では無く骨髄移植の場合ではありますが、尻尾よりも眼窩の方が肺塞栓を起こしやすい印象があります。

過去スレでも話題にありますが、細胞のviabilityは大丈夫でしょうか。DNAやヒストンなど細胞内容物には血液凝固を活性化させるものも多くありますし、アグリゲーションの原因にもなるでしょう。例えば実験の後半で肺塞栓が起きやすいとか、そういった経験があったら気にかけると良いかもしれません。

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No.5581-3 - 2016/11/29 (火) 13:07:58 - ema
細胞数(濃度はどうでしょう)は問題ないと思います。
アグリゲーションが問題だと思いますので、シリンジに分注して時間が経つと筒内でアグルので、作業の近くにベンチがあるなら、1本もしくは2本づつ直前ピペッティング+フィルターで補充して行った方がいいかも。
尾からでなく、眼からゆっくり、でも代用できるならこちらの方が楽です。
過去の討議で以下のもありました。
http://kenkyuu2.net/cgi-biotech3/biotechforum.cgi?mode=view;Code=2507

(無題) 削除/引用
No.5581-2 - 2016/11/28 (月) 23:08:08 - iv 乙
フィルター(メッシュみたいな、細胞塊を除くのに使うやつ)通せばどうよ。

尾静注での肺塞栓予防について 削除/引用
No.5581-1 - 2016/11/28 (月) 19:21:33 - 初心者
 現在マウス(C57BL/6)にマウス大腸癌細胞CMT93を1~3×10^5個を尾静注して、肺転移モデルを作成しようと実験しております。初めのうちは尾静注がうまくいかなかったのですが、練習を重ね要領を得てきました。しかし最近、尾静注の際にまったく無抵抗でキレイに注入できた場合には肺塞栓を起こして(?)マウスがすぐに死んでしまい、困っております。希釈時にはピペッティングを行い、文献を参照するとtail vein injectionで細胞数もほぼ同等であるものが多いのですが、同様の実験を行っている方がいらっしゃいましたら肺塞栓を起こさない工夫等につきましてご教授いただけましたら幸いです。

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