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(無題) 削除/引用 No.999-6 - 2009/08/07 (金) 15:13:08 - ウイルス 1％くらいしかGFP+がありません。。。Ecoのパッケージングラインだと80％位はGFP＋になるのですが。 同じベクターでどっちでも行けるはずですよね？？？？

293TにおけるAmpho Rって。。。 削除/引用 No.999-5 - 2009/08/07 (金) 06:06:11 - Tb 強く発現しているのですかねぇ？私個人の経験としては、Amphotropicのレトロを293T系の細胞に感染させようとしても全然感染しなかったのです。pcDNA3.1-Amphotropic Rreceptor (Glvr-2)をtransientで入れて、それからレトロで感染、なんてことをしました。まあ、packaging中のとなりの細胞とかはウイルスの局所濃度が高くなっていて入るのかもしれませんが・・・

http:// 削除/引用 No.999-4 - 2009/08/06 (木) 22:23:49 - TK-1 レトロは分裂していない細胞にはintegrateされないので、感染が起こる前にコンフルエントになって分裂が止まると感染しなくなります。

(無題) 削除/引用 No.999-3 - 2009/08/06 (木) 18:46:42 - とも >最終的には全ての細胞がウイルスを産生するようになるのでしょうか？ ウイルスベクターがSelf-inactivationのLTRを持たなければ、すべての細胞で産生するんじゃないかな。経験上GFPは100%の細胞で発現しています。パッケージング cell lineじゃない293だと50~80%くらいのトランスフェクション効率です。

(無題) 削除/引用 No.999-2 - 2009/08/06 (木) 18:05:03 - retroboy 発現を遺伝子発現で見ると、大体、１００％近くになりますね。ただ、たまにうまく行かないときは、まばらな状態になることもあります。もちろん、細胞毒性のあるものを発現しようとしてそうなるのはわかるのですが、全くinnocentでも時間をかけても、ある程度以上にはならない場合があり、理由がよくわからないでいます。そういう場合は、当然ながら、infectionもあまりうまく行きません。

アンフォトロピック　レトロウイルス 削除/引用 No.999-1 - 2009/08/06 (木) 17:49:13 - ウイルス Amphopack-293にレトロウイルスベクターをトランスフェクションしてレトロウイルスを産生させた場合、産生されたウイルスはトランスフェクションされなかった細胞にも感染し、最終的には全ての細胞がウイルスを産生するようになるのでしょうか？ 例えばGFPを発現するベクターの場合、培養が進むとGFP+の細胞は100％になるのでしょうか。 GP2-293の場合はトランスフェクションされた細胞だけがウイルスを産生すると思いますが、Amphopack293の場合を教えてもらえたら助かります。

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