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灌流固定した組織の硬さ トピック削除
No.876-TOPIC - 2009/07/16 (木) 23:13:45 - notabene
いつも大変参考にさせて頂いております。
当方、灌流固定を行ってマウス脳サンプルを作製しておりますが、灌流固定後に脱脳してみますと、通常やっていたときよりも硬さがありませんでした。
 生食で脱血後、4%PFAで行っており、PFA変換後に痙攣、硬直もみられるのですが、肝心の組織は通常の灌流固定後よち柔らかくなりました。
 試薬の温度なども考えてみたのですが、こちらの過去のトピックスを拝見したところ、試薬の温度には特に問題がないように思えました。
 大変恐縮ではありますが、お力をお借りできればと存じます。何卒よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.876-2 - 2009/07/17 (金) 01:11:20 - CJ
脱脳後一晩ぐらい固定しておけば硬くなりますよ。
ただそれと固定の良し悪しは別問題ですね。
脳の硬さ、とか脱血具合ってのはある程度の固定良し悪しの指標になりますが、絶対的ではありません。実際に染色を試みて見るのが良いかもしれません。

灌流固定した組織の硬さ 削除/引用
No.876-1 - 2009/07/16 (木) 23:13:45 - notabene
いつも大変参考にさせて頂いております。
当方、灌流固定を行ってマウス脳サンプルを作製しておりますが、灌流固定後に脱脳してみますと、通常やっていたときよりも硬さがありませんでした。
 生食で脱血後、4%PFAで行っており、PFA変換後に痙攣、硬直もみられるのですが、肝心の組織は通常の灌流固定後よち柔らかくなりました。
 試薬の温度なども考えてみたのですが、こちらの過去のトピックスを拝見したところ、試薬の温度には特に問題がないように思えました。
 大変恐縮ではありますが、お力をお借りできればと存じます。何卒よろしくお願いいたします。

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