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(無題) 削除/引用 No.859-3 - 2009/07/15 (水) 08:36:58 - KKK TS様 ご助言ありがとうございます。 抵抗値がS字を描くとのことで安心いたしました。 色々調査したつもりだったのですが、情報を見つけられず 1ヶ月以上悩んでおりましたので、とても有難い情報でした。 もしよろしければTJの専門書をお教えていただけますでしょうか。 Rhodamine-123はP-gpの基質であるため、 P-gpの発現や活性の評価として使用しています。 論文ではA to BとB to Aの透過の差が10倍以上となっておりますので 私の培養しているCaco-2ではP-gpの発現もしくは活性が低い ＝分化が正常でないと考察しております。 説明不足で申し訳ありませんでした。

(無題) 削除/引用 No.859-2 - 2009/07/14 (火) 19:37:20 - TS 1について。 一般的に、Caco-2細胞でのTERの上昇は、S字を描きます。最終的なTERの絶対値は、500-2000 ohm x cm2と、かなりラボによってばらつきますが、描く変化は同じです。なので、それについては問題ないでしょう。 なぜS字を描くのかは正確にはわかっていないと思いますが、コンフルエントになったときに、TJはそれなりにできているはず、TERも高くなります。しかしその後、まだまだ細胞が増殖し、円柱状になっていきますので、細胞間にあたる部分も増えていきます（ちょっと説明しにくいですが）。つまり、イオンが透過できるところが増えていくわけです。そうすると、細胞間に当たる部分が増えていく程度（イオンの透過が増える）とTJが成熟していく程度（イオンの透過が減る）のバランスによって、TERがぶれることになるそうです。というのが、TJの専門書に書いてありました。 2について。 Rhodamine-123というは、細胞間通過マーカーとして使用しているのですか？　その透過係数の差でTJの成熟度や分化がわかるということになっているのでしょうか？ 透過係数の算出方法をよく知らないのですが、TJ透過選択性には方向性がないことになっていると思いますが。つまりTJ経路に限れば、A to BとB to Aの透過速度は、分化に関係なく同じはずです。

Caco-2細胞抵抗値と方向性について 削除/引用 No.859-1 - 2009/07/14 (火) 15:56:39 - KKK Caco-2細胞をtranswellに播種し、透過実験を試みておりますが うまくいきません。状況は下記の通りです。 1　抵抗値が7〜9日で300〜500Ω・cm2に上昇し、その後200Ω・cm2程度に低下後、14〜15日で再上昇し、21日頃500Ω・cm2に落ち着きます。論文等では上昇のみが報告されているので、この推移の原因がわかりません。 2　Rhodamine-123の透過で分化を確認していますが、吸収方向と排出方向のみかけの透過係数の差が3倍程度しかありません。 この2つのことから、正常に分化が進んでいない可能性を考えておりますが、培地は報告されている通りですし、原因がわかりません。 よろしくお願いいたします。

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