Bio Technical フォーラム

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浮遊細胞のリポフェクション トピック削除
No.839-TOPIC - 2009/07/10 (金) 14:55:50 - mm
現在浮遊細胞へのリポフェクションによるベクターの導入を試みています。
これまで接着細胞ではうまくいっていたのですが、浮遊細胞では全くはいらず困っています。

リポフェクション試薬はQIAGENのEffecteneとinvitrugenのLipofectamine LTX with PLUSを使っています。Lipofectamineのほうがわずかにはいった感じでありましたが。。。

それから、fibronectinで細胞をくっつけても導入はあまり変わらないでしょうか？


なにかよい方法をご存じの方がいらっしゃいましたらヨロシクお願いします。
　
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これからためすけど 削除/引用
No.839-4 - 2009/07/14 (火) 18:43:52 - ema
これから試すから、いまいちの情報ですが、Takaraの Xfectのサンプル貰ったのでどうかなあと。
まだ使ってないけどレトロが使えるならレトロネクチンとか。（なんかTakaraばっかりだけど）

昔、Lipofectamine LTXでplate遠心してかけて、数％で、Sort（うちの系はとりあえずそれでもいいから）したことは。

(無題) 削除/引用
No.839-3 - 2009/07/10 (金) 18:08:31 - MP
細胞株は何でしょうか？
株と試薬の組み合わせによっては、そこそこ入るものもあります。

(無題) 削除/引用
No.839-2 - 2009/07/10 (金) 16:23:15 - ITD
苦労しますよね。fibronectinはやったことないですが、あきらめてウイルスを使っています。electroporationだと条件を厳しく決めれば接着細胞並みにかなり良くはいるし、生存率も高くできるという話は聞きました。fibronectinコートで貼り付けて効果あるのでしょうか？

浮遊細胞のリポフェクション 削除/引用
No.839-1 - 2009/07/10 (金) 14:55:50 - mm
現在浮遊細胞へのリポフェクションによるベクターの導入を試みています。
これまで接着細胞ではうまくいっていたのですが、浮遊細胞では全くはいらず困っています。

リポフェクション試薬はQIAGENのEffecteneとinvitrugenのLipofectamine LTX with PLUSを使っています。Lipofectamineのほうがわずかにはいった感じでありましたが。。。

それから、fibronectinで細胞をくっつけても導入はあまり変わらないでしょうか？


なにかよい方法をご存じの方がいらっしゃいましたらヨロシクお願いします。
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