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ELISPOT assay トピック削除
No.821-TOPIC - 2009/07/07 (火) 10:41:52 - ポスドク
ヒトB細胞（末梢血または脾細胞）を用いて抗A、抗B抗体産生細胞をELISPOTを用いて検出する予定です。いくつかの論文ではIscove's modified Dulbecco's medium（IMDM)に0.4%のBSA、5ug/ml insulin、5ug/ml transferrin、5ng/mlsodium seleniteそして50umol/l 2-mercaptoethanol(2ME)が用いられています。insulin、transferrin、sodium seleniteそして2-MEの必要性をご存知の方ご教授下さい。
特に2-MEを用いるとIgM抗体の構築が破壊されて検出が下がると思うのですが・・
　
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(無題) 削除/引用
No.821-2 - 2009/07/07 (火) 12:11:35 - 経験者
2-MEは確かに還元剤ですが、IgMが還元されるほどの量ではないでしょう。

実際、ハイブリドーマを培養する際にも2-ME入れます。

このときの目的はシスチンをシステインに還元するためなどでしょう。

ELISPOT assay 削除/引用
No.821-1 - 2009/07/07 (火) 10:41:52 - ポスドク
ヒトB細胞（末梢血または脾細胞）を用いて抗A、抗B抗体産生細胞をELISPOTを用いて検出する予定です。いくつかの論文ではIscove's modified Dulbecco's medium（IMDM)に0.4%のBSA、5ug/ml insulin、5ug/ml transferrin、5ng/mlsodium seleniteそして50umol/l 2-mercaptoethanol(2ME)が用いられています。insulin、transferrin、sodium seleniteそして2-MEの必要性をご存知の方ご教授下さい。
特に2-MEを用いるとIgM抗体の構築が破壊されて検出が下がると思うのですが・・
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