>[Re:5] 初代初心者さんは書きました :
>
> 今回は以下の4種類neuronで行いたいと思ってます。
> cortical neuron
> hippo
> mesencephalon
> cerebellum granule
>
> この中で、弱いneuronはあるでしょうか?
> み さんの中で、オススメの参考文献、教科書などあれば教えていただきたいです。
前者2細胞しか経験ありません。いずれもneurobasal+B27でいけるでしょう。hippoはE18,corticalはもう少し早めのE16あたりが一般的だったかなあ(これはちょっと曖昧)。一応E18からでもcorticalも取れますが調製しにくい。
どちらかというとhippoの方が突起観察に適したneuronが調製しやすいですかね。樹状突起上のspineなど興奮性neuronに特徴的な構造ができるでしょうし。hippoからだとinterneuronも混在するでしょうが。
corticalの方は細胞数は稼げるけど樹状突起やspineの発達がpoor。
優先順位はKO遺伝子の発現部位と見たい現象が何かでしょうね。
文献はBanker GAが本家?
B27supplement使うなら:
J Neurosci Methods. 2008 Jun 30;171(2):239-47.
NS21: re-defined and modified supplement B27 for neuronal cultures.
J Neurosci Res. 1995 Dec;42(5):674-83.
Serum-free B27/neurobasal medium supports differentiated growth of neurons from the striatum, substantia nigra, septum, cerebral cortex, cerebellum, and dentate gyrus.
J Neurosci Res. 1993 Aug 1;35(5):567-76.
Optimized survival of hippocampal neurons in B27-supplemented Neurobasal, a new serum-free medium combination.
他のsource(mesencephalon、cerebellum granule)は良く知らないです。 |
|