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牛の白血球の固定 トピック削除
No.722-TOPIC - 2009/06/22 (月) 09:37:25 - can
牛のリンパ球のサブセットをフローサイトメトリーを用いて実験しているものです。抗原抗体反応を行った後に1%のパラホルムアルデヒドを最後に加え、固定することによって、フローサイトメトリーを使った測定を後日に行えると本に書いてあったのでやってみました。しかし1%のPFAを加えても0.5%のPFAを加えてもFSCは低く、SSCは高くなり、染色も落ちてしまい、データとして全く使えない状態です。牛の白血球でうまく固定するやり方を知っている方、ぜひ教えてください。
 
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ありがとうございます 解決済み 削除/引用
No.722-3 - 2009/08/04 (火) 13:42:08 - can
やはり当日に測定してしまった方がよいみたいですね。ありがとうございました!

(無題) 削除/引用
No.722-2 - 2009/06/22 (月) 17:53:36 - ami
固定すると、FSCは低くなり、SSCはいろいろなります。染色してから固定すると蛍光はへぼくなり、固定してから染色すると一部の抗体は染まりません。

牛の白血球の固定 削除/引用
No.722-1 - 2009/06/22 (月) 09:37:25 - can
牛のリンパ球のサブセットをフローサイトメトリーを用いて実験しているものです。抗原抗体反応を行った後に1%のパラホルムアルデヒドを最後に加え、固定することによって、フローサイトメトリーを使った測定を後日に行えると本に書いてあったのでやってみました。しかし1%のPFAを加えても0.5%のPFAを加えてもFSCは低く、SSCは高くなり、染色も落ちてしまい、データとして全く使えない状態です。牛の白血球でうまく固定するやり方を知っている方、ぜひ教えてください。

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