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配列特異的 proteaseについて トピック削除
No.714-TOPIC - 2009/06/20 (土) 21:26:59 - aileron
今、大腸菌からrecombinant proteinの精製をやろうとしています。
タンパク質全長のものを精製したいので、N末にGST tag、C末にHis tagをつけて精製し、その後proteaseでtagを切り離すことを計画しています。GSTの切り離しには、PreScission Protease (GE Healthcare)を使う予定ですが、Hisの切り離しに何を使うか現在検討中です。

どなたか、4℃で切れて配列特異性の高いproteaseをご存じないでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.714-3 - 2009/06/21 (日) 11:17:11 - aileron
中年様
 
 レス、ありがとうございます。
 以前知り合いからTEV proteaseだと認識配列以外で切れてしまって今は使っていないと聞きました。TEV以外で、実際に使用して具合のよいものはないものでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.714-2 - 2009/06/20 (土) 21:52:53 - 中年
TEVプロテアーゼは?

http://www.filgen.jp/Product/Bioscience4/indexmenu.htm

配列特異的 proteaseについて 削除/引用
No.714-1 - 2009/06/20 (土) 21:26:59 - aileron
今、大腸菌からrecombinant proteinの精製をやろうとしています。
タンパク質全長のものを精製したいので、N末にGST tag、C末にHis tagをつけて精製し、その後proteaseでtagを切り離すことを計画しています。GSTの切り離しには、PreScission Protease (GE Healthcare)を使う予定ですが、Hisの切り離しに何を使うか現在検討中です。

どなたか、4℃で切れて配列特異性の高いproteaseをご存じないでしょうか?

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