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(無題) 削除/引用 No.704-5 - 2009/06/20 (土) 12:32:51 - setec liveで見ないといけない場合は、chamber slideを使いますが、何しろ高いので、普通の免疫染色なら、カバーガラスをオートクレーブして使ってます。そのまま箱から出したのをなにかの入れ物に入れてdryのままオートクレーブすればいいです。滅菌したストックが切れたりすると炎であぶることもありますが、へたにやるとすぐ割ってしまうので、うちではあくまで緊急用です。

(無題) 削除/引用 No.704-4 - 2009/06/20 (土) 11:37:42 - 小児科医師（ゆとり教育） 私はLabtecのChmaberスライドを使っています。 http://www.emsdiasum.com/microscopy/products/preparation/chamber.aspx

(無題) 削除/引用 No.704-3 - 2009/06/20 (土) 09:12:23 - genji IWAKIやBDでカルチャースライドというものが売っています。 スライドグラス上で細胞を培養できます。 1〜8-wellタイプのものがあって免疫染色等が行えます。 なかなか便利ですよ。

(無題) 削除/引用 No.704-2 - 2009/06/20 (土) 07:49:02 - 通りすがり >Dishのままの各染色へ持っていく固定法を教えて下さい。 >スライドガラス(SG)はどのようなもの(自分で滅菌? gradeは? それとも専用の >SGが買える?)なのでしょうか。 スライドグラスでは普通やらないでしょうね、 カバーグラスのほうでやってその上に細胞を生やして、カバーグラスをdishに入れたまま、抗体反応→洗浄とかもやっていって最後にカバーグラスをスライドガラスに貼り付けて顕鏡するということです。 通常自分がやってるものでは35mmのdishか6wellのdishに 18x18から22x22ぐらいのサイズのカバーグラス(一度70%EtOHに浸して自分で消毒してから火で軽くあぶってアルコールをとばしたもの)をdishに載せます。 だいたいdishの丸い形に 正方形のカバーグラスがぴったり収まるか 少し小さいぐらいのサイズがやりやすいと思います。 他に必要なものはガラスをdishから取り出したりするときのために 先の細くてガラスをつかみやすいピンセットが必要でしょうか。 接着が弱い細胞なら必要に応じてカバーグラスの入ったdishに coatingの溶液を入れてしばらくcoatingしてからよく洗浄して普通に細胞を播きます。接着が強い細胞なら特にcoatingしなくてもカバーグラスにくっつきます。 それで２４〜４８時間程度培養してカバーグラスの上に 適度な密度になってきたら、dishにカバーグラスを入れたたまま、 培地を捨てて、PBSとかで1.2度洗ったら、そこにそのまま固定液を入れて その後の洗浄とかも培地を交換するみたいな感じでやっていけばよいのです。 慣れるとすごく楽ですよ。 6wellとか12wellだと同時に複数のサンプル処理できますし。

染色前の細胞固定法 削除/引用 No.704-1 - 2009/06/19 (金) 14:54:18 - うちだ Dishでマウスの腫瘍系細胞をかっています。 免疫染色とoilred'O染色をしたいのですが、Dishのままの各染色へ持っていく固定法を教えて下さい。またprimitiveな質問ですが、『カバーガラスの上に細胞をかう』と書いてありますが、スライドガラス(SG)はどのようなもの(自分で滅菌? gradeは? それとも専用のSGが買える?)なのでしょうか。 ご教授の程、宜しくお願い致します。

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