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PC12の培養に適したプレート トピック削除
No.665-TOPIC - 2009/06/16 (火) 12:14:19 - こんにちわ
単純な質問です。
皆さんPC12のNGF誘導の際、どのようなプレートで行ってますか?

私はnuncΔ処理の24穴プレートで行いましたが、突起の伸長がいまいちでしたので、ポリDリジンコートのプレートで行っています。ただ、6穴と96穴しかないため6穴を使ったのですが、NGFをやたらと使用するため、コスト高な状況です。

おすすめのプレートや製品、過去の体験談など教えていただきたく思います。

論文等には載ってない情報ですので、ここで質問させていただきました。
どうぞよろしくお願いいたします。
 
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No.665-8 - 2009/06/16 (火) 15:02:02 - こんにちわ
うわー!
ご紹介の論文、かなり参考になります。
こういうのがあるとボスにも話がしやすいですしね。
それと、96穴でやってたという情報もとても参考になります。

わざわざ先輩にまで聞いていただいて本当にありがとうございます!!

(無題) 削除/引用
No.665-7 - 2009/06/16 (火) 14:23:34 - 通りすがり
追伸です。
PC12細胞(の亜株)を用いてNGF刺激による神経突起の伸長を測定している
ラボの先輩に質問したところ、96well plateに自分でPLLをcoatしている
そうです(再現性も十分あり安定していたとのことです)。
ただ、PLL coatよりもcollagen coatの方が強く伸長したとのことです。

また、参考になりそうな論文を紹介してもらったので載せておきます。
Ivankovic-Dikic I, Grönroos E, Blaukat A, Barth BU, Dikic I. "Pyk2 and FAK regulate neurite outgrowth induced by growth factors and integrins." Nat Cell Biol. 2000 Sep;2(9):574-81.

ご存知かもしれませんが、実験器具メーカーのHPなどにも情報があります。
http://www.bdj.co.jp/falcon/products/polylysine-coat.html
(PC12細胞についても3報ほど文献が引かれているようです。)

(無題) 削除/引用
No.665-5 - 2009/06/16 (火) 13:26:22 - こんにちわ
なるほど。
それは考えておりませんでした。
特殊コーティングの既製品は使用期限も長くないですからね。

安定した結果が得られるかの心配はありますが、調べてみようと思います。

(無題) 削除/引用
No.665-4 - 2009/06/16 (火) 12:55:51 - 通りすがり
6wellや96wellではなく24well plateであることが重要なのであれば、
素の24well plateを購入して、ご自分でPDL(やPLL)をコートされてみては
いかがでしょうか。市販品を購入するより安く上がるかもしれませんよ。

(無題) 削除/引用
No.665-3 - 2009/06/16 (火) 12:31:47 - こんにちわ
ポリLリジンもよく耳にしますね。
ただ、私が使用したのは、nuncの製品番号152035ポリDリジンコーティングプレートです。
試供品のような形で業者から少数いただき、試してみたという状況です。
購入しようかと考えてますが、安くないし24穴の製品がないし。。。迷ってます。

コーティングプレートも、ポリLリジンやコラーゲンなど色々ありますが、すべてについて試すこともできませんので、皆さんがどのようなものを使用しているのか参考にさせていただきたく思いました。

ちなみに、バイオ実験イラストレイテッドにPC12Dについて載ってますが、ここでは特殊コーティングは不要となってます。(亜種なので参考程度ですが。)

みなさんの実際はいかがでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.665-2 - 2009/06/16 (火) 12:18:43 - 経験者
>私はnuncΔ処理の24穴プレートで行いましたが、突起の伸長がいまいちでしたので、ポリDリジンコートのプレートで行っています。

ポリLリジンコートでは?

PC12の培養に適したプレート 削除/引用
No.665-1 - 2009/06/16 (火) 12:14:19 - こんにちわ
単純な質問です。
皆さんPC12のNGF誘導の際、どのようなプレートで行ってますか?

私はnuncΔ処理の24穴プレートで行いましたが、突起の伸長がいまいちでしたので、ポリDリジンコートのプレートで行っています。ただ、6穴と96穴しかないため6穴を使ったのですが、NGFをやたらと使用するため、コスト高な状況です。

おすすめのプレートや製品、過去の体験談など教えていただきたく思います。

論文等には載ってない情報ですので、ここで質問させていただきました。
どうぞよろしくお願いいたします。

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