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(無題) 削除/引用 No.584-6 - 2009/06/02 (火) 12:30:32 - さ TK様、 > 細胞濃度やflow rateにより、どうしてもconflictによるabortが出るので、この方法でも原理的に全細胞がカウントできることにはなりません。 まあ、細胞流速に関しては十分遅くということが前提だったということで。でも、いわゆるconflictという言葉は、ソートの時の液滴選択のときに右にも左にもあってはまってしまうので、そういうのはソートしないという状況をさすのですよね？このときでもカウンターは動いているはず。ダブレット(というか重なって流れてきた細胞)は見抜けないという意味でいいですよね？

(無題) 削除/引用 No.584-5 - 2009/06/02 (火) 11:09:33 - ~ すいません。 FACSと勘違いしていました。 ベックマン社のコールターカウンターでは、一応は絶対数としてカウントされていました。 補正すればもっと精度が上がるのかもしれませんが、血球計算盤と大体同じ値が出ていましたので、特に気にせず使っていました。

http:// 削除/引用 No.584-4 - 2009/06/02 (火) 10:33:32 - TK-1 >[Re:3] ささんは書きました : > BD Flow/Calibur/LSRIIを具体的にイメージして説明します。 > トピ主さんはチューブに1 mlのサンプルを入れて全部流しきったら、1 mlあたりの細胞数がカウントできるのでは、と考えられたのだと思います。しかし、実はサンプルアームを横にしてサンプルの入ったチューブを取り付けたとき、かなりの早さでサンプルが吸い込まれています（アスピレーションチューブは二重構造になっており、このときは外側の経路に入ってます）。また、アームを正面にした瞬間も、100 ulくらいがくっと吸い込まれます。そのため、1 ml入れたからといって、1 ml全量ははかれないのです。 この吸い込みが嫌いなので、outer sheathを外して使っている人は多いです。通常流す時は100ulくらいのvolumeで使っています。 > 一方、Ariaでは吸い込んだはじめの１細胞目からカウントできますので、最後に気泡を入れる覚悟で流せば、原理的には全細胞数がカウントできることになります。しかし、それでも1 mlいれた全量をまったく無駄なく吸い込んでいるのかというとちょっと信用はできませんし、なにぶん時間がかかりすぎて実用的ではないでしょう。 細胞濃度やflow rateにより、どうしてもconflictによるabortが出るので、この方法でも原理的に全細胞がカウントできることにはなりません。

(無題) 削除/引用 No.584-3 - 2009/06/01 (月) 21:55:34 - さ BD Flow/Calibur/LSRIIを具体的にイメージして説明します。 トピ主さんはチューブに1 mlのサンプルを入れて全部流しきったら、1 mlあたりの細胞数がカウントできるのでは、と考えられたのだと思います。しかし、実はサンプルアームを横にしてサンプルの入ったチューブを取り付けたとき、かなりの早さでサンプルが吸い込まれています（アスピレーションチューブは二重構造になっており、このときは外側の経路に入ってます）。また、アームを正面にした瞬間も、100 ulくらいがくっと吸い込まれます。そのため、1 ml入れたからといって、1 ml全量ははかれないのです。 一方、Ariaでは吸い込んだはじめの１細胞目からカウントできますので、最後に気泡を入れる覚悟で流せば、原理的には全細胞数がカウントできることになります。しかし、それでも1 mlいれた全量をまったく無駄なく吸い込んでいるのかというとちょっと信用はできませんし、なにぶん時間がかかりすぎて実用的ではないでしょう。

(無題) 削除/引用 No.584-2 - 2009/05/31 (日) 18:14:57 - ~ あなたが使用しているFACSがサンプルを流している絶対量を測定できないからではないでしょうか。 基本的には気圧で細胞懸濁液を押し出しているだけですので、厳密な流量を測ることができないからでしょう。

フローサイトメーターの細胞数カウント 削除/引用 No.584-1 - 2009/05/31 (日) 17:53:27 - 山田真央 フローサイトメーター初心者です。 １つ教えてください。 フローサイとメーターで細胞をカウントする際、 内部標準ビーズを使わないと絶対数が表示でき ないのは何故ですか？

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