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銀染色で、金属錯体検出
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No.579-TOPIC - 2009/05/30 (土) 09:26:39 -
tetuya
はじめまして。
金属結合蛋白をSDS-PAGEで分離し、銀やCBBで染色しているのですが、
CBBでうっすらバンドがでても、銀染色では検出できません。
銀染色は、錯体を検出できないのでしょうか?
ご教授宜しくお願いします。
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No.579-3 - 2009/05/30 (土) 12:24:01 - 全身金属
そもそもSDS変性してるから、
キレート活性は無くなってるのでは?
そんなことは無いと思います
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No.579-2 - 2009/05/30 (土) 12:03:50 - 笑い男
金属結合性というよりは、タンパク質全体の性質の方が
影響しているものと思います。酸性/塩基性アミノ酸が
どうだとか、糖鎖がどうだとか・・・・
ZnフィンガーとかヘムFeとかHis−タグとか、とかとかとか・・
金属結合といっても色々あるけど、所詮1個のタンパク質に
一箇所とか二箇所の結合部位しかないので、
金属結合部位が何かをキレートしたところでそんなに影響は
出ないと思います。
一応、Hisタグを発現させて銀染は普段行っているので、
Hisに関しては影響ないことを言い切ります。
銀染色で、金属錯体検出
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No.579-1 - 2009/05/30 (土) 09:26:39 -
tetuya
はじめまして。
金属結合蛋白をSDS-PAGEで分離し、銀やCBBで染色しているのですが、
CBBでうっすらバンドがでても、銀染色では検出できません。
銀染色は、錯体を検出できないのでしょうか?
ご教授宜しくお願いします。
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