植物のバイサルファイトPCRはなかなかうまくいきません。
PCR自体はかからなかったり、非特異的なバンドが増えたり、まだはプライマーダイマーができたりします。
ポジコンはきちんと増えるため、テンプレトーではなく、プライマーの設計に問題があると考えています。
そこで、植物のバイサルファイトPCRのプライマーを設計のコツを伺いたいです。
ちなみに、私が以下のことを注意してプライマーを設計します。
1、増殖領域を700bp以下にする。
2、両側のプライマーはできるだけCを避け、かつG含量をできるだけ同じようにする。
3、プライマー長さは35bp前後
以上で何か間違いや不足があれば是非教えてください。
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