Bio Technical フォーラム

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T細胞(プライマリー)を用いたCHIP ASSAY トピック削除
No.545-TOPIC - 2009/05/24 (日) 04:31:23 - MY
いつも大変お世話になってます。

現在、ある遺伝子KOマウスにおける抑制性T細胞の分化制御およびプロモーター結合淡白のダイナミズムをChipによってみています。

細胞は、脾臓より精製してから各種サイトカイン+刺激を加えて、分化誘導をかけた物を使っています。

セルラインを用いた実験は多く見るのですが、プライマリー細胞で分化誘導をかけた物を用いる際、どのような事に注意したらよいのでしょうか?

どうも結果が安定しません。

固定のときは、細胞を回収せず、MEDIUMに固定液をそのままドロップしてからやったほうがよいとか?

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.545-2 - 2009/05/27 (水) 23:04:10 - pa
クロマチンの断片化は超音波ですか?酵素ですか?

T細胞(プライマリー)を用いたCHIP ASSAY 削除/引用
No.545-1 - 2009/05/24 (日) 04:31:23 - MY
いつも大変お世話になってます。

現在、ある遺伝子KOマウスにおける抑制性T細胞の分化制御およびプロモーター結合淡白のダイナミズムをChipによってみています。

細胞は、脾臓より精製してから各種サイトカイン+刺激を加えて、分化誘導をかけた物を使っています。

セルラインを用いた実験は多く見るのですが、プライマリー細胞で分化誘導をかけた物を用いる際、どのような事に注意したらよいのでしょうか?

どうも結果が安定しません。

固定のときは、細胞を回収せず、MEDIUMに固定液をそのままドロップしてからやったほうがよいとか?

よろしくお願いします。

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