TMB solutionは以下の3つのストック溶液を作っておき、使用直前に混ぜて調製しています。
TMBは粉末を購入していますが、安価ですし、少量しか使用しないので、かなり経済的です。
他の試薬類もすべて安く手に入るものばかりです。
41 mM TMB ストック溶液は、数回の凍結融解を繰り返しても、結果に影響はありませんでした。
ただし、溶媒に使っているDMSOが融解するのに時間がかかるので、1.5 mLの遮光チューブに小分けして保存しています。
(1) 0.2 M クエン酸バッファー, pH4.0(冷蔵保存)
クエン酸一水和物 13.85 g
クエン酸三ナトリウム二水和物 10.00 g
水 q.s. to 500 mL
(2) 41 mM TMB(冷蔵、遮光保存)
TMB (SIGMA #T2885) 49.2 mg
DMSO 5 mL
(3) 30 % 過酸化水素(冷蔵保存)
※ TMB solition(用時調製)
(1) 20 mL
(2) 250 uL
(3) 3.5 uL |
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