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TEER測定 トピック削除
No.414-TOPIC - 2009/05/01 (金) 10:22:20 - 名無し
Caco-2細胞を用いてtransport試験を行うのですが、
抵抗値測定が出来ずに困っています。

TEER測定器具はMillcell-ERSを使用しているのですが、
何度やっても抵抗値が0と表示されてしまいます。

ちなみに、電極の平衡化には30mM PBSを用い、抵抗値測定15min前には70%エタノールに浸してあります。

抵抗値が測定できないために、実験が進まずにいます。
どうか、御回答のほどよろしくお願い致します。
 
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ありがとうございます。 削除/引用
No.414-5 - 2009/05/26 (火) 10:36:27 - 名無し
たくさんのアドバイスありがとうございます。

電池交換…電極の交換…

いろいろ試してみましたが、やはりできませんでした。
修理見積だけでも、3万近くかかると言われ、
検討を重ねた末、新台購入の方向となりました。

本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.414-4 - 2009/05/03 (日) 23:46:03 - TS
メンブレンの抵抗値が表示されないようだと、少なくとも機能していないようですね。でも残念ですが、どのように故障してるのかは、指摘しにくいです。

まず、電池をすべて交換してみましたか?
単三と角型の電池が入ってると思います。
電池の交換は、low batteryと表示されたとき、ということになっていますが、私の記憶では、それが表示されるのは表示用(ディスプレイ用)の電池が切れそうになったときだけで、測定用の電池が切れたときには表示されなかった気がします。なので、壊した当てがないときには、意外にも電池交換だけで解決することもあります。(どっちの電池がどっちかは忘れました)

それでも、うごかなければ、素直に修理に出すしかないですね。
ただ、Milliporeは、Millicellに関してはサービスがいまいちで、修理見積もりだけで、数万円取られますし、修理とはいっても基板洗浄しかしないようです。
だから、もし電極が壊れていると予想できるなら(電線のどこかが切れてそうとか)、電極を買ってみるのは手ですね。結果的に、本体が修理になったとしても、その電極は、いずれは使えるわけですから。電極は、2万くらいだったような。
それと、代替品を頼めば、貸してくれますよ。粘れば、1ヶ月くらいは借りれます。Caco-2がうまく培養されいるかどうかとか、短期間で終わる実験であれば、その場をしのぐことはできるかもしれません。

個人的には、TEST機能は、なんの当てにもならないような気がします。
あれが999を表示しないことなんてないですよね?(笑

ありがとうございます。 削除/引用
No.414-3 - 2009/05/03 (日) 15:09:47 - 名無し
DMEM培地中での抵抗値を測定しても、
細胞を播種していないwellで抵抗値を測定しても、
表示は0〜1となってしまいます。

Millcell-ERSの故障とはどういうことなのでしょうか?
TESTではきちんと999or1.00を指しています。

電極の問題だと思いますか?
それとも本体の故障も考えられるのでしょうか?

御回答いただけると光栄です。

2つの可能性がありますが。 削除/引用
No.414-2 - 2009/05/01 (金) 12:24:51 - TS
可能性としては、Millicell-ERSが故障しているか
細胞が分化していない、のいずれかだと思います。

TER測定に特に特別な技術はないですし、実際問題、TERの測定には、平衡化も必要ありません(Milliporeの人が言っていました)。

故障を確認する方法として、
例えば、細胞を播いていない状態で、TERを測定したことはありますか?

DMEMなどでTranwellを満たした状態で、12mm-transwell, 0.4μmポアサイズのものだと、90-120ohm*cm2の数値が出ると思います。
それは確認できるのでしょうか?
これが0 ohm*cm2と表示されているのであれば、故障していると思います。

TEER測定 削除/引用
No.414-1 - 2009/05/01 (金) 10:22:20 - 名無し
Caco-2細胞を用いてtransport試験を行うのですが、
抵抗値測定が出来ずに困っています。

TEER測定器具はMillcell-ERSを使用しているのですが、
何度やっても抵抗値が0と表示されてしまいます。

ちなみに、電極の平衡化には30mM PBSを用い、抵抗値測定15min前には70%エタノールに浸してあります。

抵抗値が測定できないために、実験が進まずにいます。
どうか、御回答のほどよろしくお願い致します。

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