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抗体の解離定数について トピック削除
No.395-TOPIC - 2009/04/24 (金) 22:11:00 - 草脱ぎ
いつもお世話になっております。
マウスモノクロ抗体を最近樹立し、抗原に対する親和性を
相対的ではなく数値で検出することが今後の課題となりました。

私が知る限り解離定数を測定すれば良いのかと思うのですが、
自分でネット等で調べた限りでは、ビアコアなどによる
受託などはありました。しかし、そういった機器無しで
自分で定量することは可能でしょうか?

経験のある方、情報等ありましたらよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.395-3 - 2009/04/25 (土) 13:28:25 - おお
抗原の濃度(量)と抗体の濃度(量)がわかれば計算ができます。
あとは生化学の本とか一読ください。

(無題) 削除/引用
No.395-2 - 2009/04/24 (金) 22:47:29 - 経験者
ELISA等で出来ますよ。

そのモノクロは精製してますよね?

濃度がわかっていれば大丈夫です。

まずELISA plateに目的の抗原を一定量をcoatingし、そこにそのモノクロの希釈系列を作ったものを反応させてELISAするだけです。

で、PODかなにかで発色したものをmicroplate readerで数値化してExcelでグラフを作成してください。

Kd(らーじけーでぃーち)は最大結合量Rmaxの半分の値を示す、抗体の濃度こそが解離定数Kd値です。

抗体の解離定数について 削除/引用
No.395-1 - 2009/04/24 (金) 22:11:00 - 草脱ぎ
いつもお世話になっております。
マウスモノクロ抗体を最近樹立し、抗原に対する親和性を
相対的ではなく数値で検出することが今後の課題となりました。

私が知る限り解離定数を測定すれば良いのかと思うのですが、
自分でネット等で調べた限りでは、ビアコアなどによる
受託などはありました。しかし、そういった機器無しで
自分で定量することは可能でしょうか?

経験のある方、情報等ありましたらよろしくお願いします。

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