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転写バッファーにどのくらい放置できますか
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No.3915-TOPIC - 2011/02/01 (火) 12:28:52 - lpl
お世話になります。
転写バッファーにゲルを入れて放置した場合、どのくらい放置しても大丈夫なものなのでしょうか。もちろんしばらくひたした後すぐ転写を始めるべきなのだと思いますが、長時間置いた後に転写されたご経験がございましたらお願いします。
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すいません
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No.3915-5 - 2011/02/02 (水) 10:36:28 - lpl
Westernでのことです。
2時間放置してしまったのですが、マーカーの拡散などなく、タンパクもきれいに転写されていました。さらにどれくらい放置できるものなのかと思いましたが、ペニーさんのご指摘通り、なるべく早く転写するに越したことはないと理解いたしました。
皆様アドバイスありがとうございます。
(無題)
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No.3915-4 - 2011/02/02 (水) 09:42:52 - ぺにー
PVDF膜に転写前の段階ですよね。
protein。
私は2-3時間転写bufferに入れたままにしていましたが、markerが拡散していましたので、
やはりすぐに転写すべきだと思います。
が、肝心のイムノブロットは問題なく行えましたが。
(無題)
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No.3915-3 - 2011/02/02 (水) 09:39:14 - ~
プラスミドDNAだと、一晩で結構ぼやけます。
RNAだと、一晩で分解してなくなったことがあります。
(どちらもミニプレップ後に泳動した話ですが)
(無題)
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No.3915-2 - 2011/02/02 (水) 08:40:36 - nana
何を何にどのように転写しようとしているのか、どのくらい放置するつもりなのか、もう少し情報があるといいのですが...
転写バッファーにどのくらい放置できますか
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No.3915-1 - 2011/02/01 (火) 12:28:52 - lpl
お世話になります。
転写バッファーにゲルを入れて放置した場合、どのくらい放置しても大丈夫なものなのでしょうか。もちろんしばらくひたした後すぐ転写を始めるべきなのだと思いますが、長時間置いた後に転写されたご経験がございましたらお願いします。
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