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酵母の膜たんぱく質の局在観察 トピック削除
No.3914-TOPIC - 2011/02/01 (火) 11:14:52 - こーぼ
酵母の膜タンパク質の局在を生細胞で観察したいと考えています。

その目的の分子は発現量が低く、GFPタグでは普通の蛍光顕微鏡ではシグナルがひろえません。
また、今回のケースでは過剰発現は種々の理由でしたくないと思っています。

免疫染色などの細胞の固定を経て染色する方法でなく、
ライブで観察するのによい方法をご存じの方がおられたら、
ご教授お願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.3914-2 - 2011/02/01 (火) 18:30:35 - 弘法
劇的な改善が見られる訳ではないとは思いますが、GFPを3〜5コピータンデムにつないで使っている論文があります。

また、励起光を横から当てて暗視野で観察することにより、弱いGFPの蛍光を検出している学会発表を見たことがあります。

酵母の膜たんぱく質の局在観察 削除/引用
No.3914-1 - 2011/02/01 (火) 11:14:52 - こーぼ
酵母の膜タンパク質の局在を生細胞で観察したいと考えています。

その目的の分子は発現量が低く、GFPタグでは普通の蛍光顕微鏡ではシグナルがひろえません。
また、今回のケースでは過剰発現は種々の理由でしたくないと思っています。

免疫染色などの細胞の固定を経て染色する方法でなく、
ライブで観察するのによい方法をご存じの方がおられたら、
ご教授お願いします。
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