遺伝子実験を行っている学生です。周りにも（ボスを含めて）遺伝子十毛権に詳しい方が居ないので助けてください。
現在、ある生物から抽出したtotal RNAを3'RACE法でcDNAを合成し縮重プライマーとAUAP用いてPCRを行い、得られた産物を用いての塩基配列解析を試みています。
増幅させたい遺伝子は、プロテインシーケンサーでアミノ酸部分配列を明らかにしたタンパク質をコードするものです。
しかし、縮重プライマーとAUAP用いて得たPCR産物を用いてDNAシーケンスを行ったのですが、AUAPだけで増幅した配列しか解析できませんでした。
イメージとして
AUAPの配列-未知配列-poly A
です。
このように、AUAPがFwプライマーとして働いてしまう場合の解決策は何かあるのでしょうか？
それとも、何か実験手順が間違っているために生じていることなのでしょうか？
ご教授よろしくお願いします。 |
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