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(無題) 削除/引用 No.3881-3 - 2011/01/26 (水) 18:15:36 - あらきち むー様 ご返信ありがとうございます。 手元にあるので早速試してみようとおもいます。 あらきち

(無題) 削除/引用 No.3881-2 - 2011/01/26 (水) 16:19:08 - むー 僕はこれを使用しています。 http://www.millipore.com/catalogue/module/C82301&country=jp&lang=ja 約30kDaのタンパク質をフィルター10K（10kDa以上のタンパク質は通過しない）を使用して濃縮、バッファー交換していますが、ほとんどロスはないです。

イミダゾールの除去で苦戦 削除/引用 No.3881-1 - 2011/01/26 (水) 15:09:52 - あらきち いつも大変お世話になっております。 現在、タンパク精製を行っているのですが、 方法は、昆虫細胞に、Hs-tagged proteinを発現させ、その後精製しています。 イミダゾールの溶出までで、目的のタンパク質(純度;95%,濃度;200 ng/uL)が得られました。 ここからが問題なのですが、その後の buffer置換がうまくいきません。（イミダゾールが反応系を邪魔する為に除去は必須） 透析を行うと、濃度が1/10になり、また脱塩カラム（PD-10）だとすべてのタンパクがありません。 これは、何かタンパク質の性質によるものでしょうか？ ちなみに、25 mM Tris-HCl pH 8.0, 50 mM NaCl, 0.5 mM MgCl2 and 50% glycerol への置換を考えています。 何かもし知っている方がいらっしゃいましたら、どんなことでも良いのでよろしくお願い致します。

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