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少量サンプルからのDNA抽出キット トピック削除
No.3807-TOPIC - 2011/01/12 (水) 18:47:03 - TMK
DNA抽出キットについての質問です。

今、植物カルスを培養し、そこからDNAを抽出しようと思っているのですが、カルスの生育が遅く少量のカルスからDNAを取らなければならない状況になってしまいました。

動物細胞や大腸菌をターゲットにしたキットはあったのですが、対植物で同じようなキットが見つかりません。

できれば、10mg以下の湿重量からDNAを抽出したいのですが、どなたかいいキットをご存じであれば教えていただきたいです。

よろしくお願いします。
 
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コメントありがとうございます。 削除/引用
No.3807-4 - 2011/01/13 (木) 12:34:10 - TMK
ゲノムサイズ的に酵母のものが使えるかわかりませんが、参考にしてみます。

情報が少なくてすみません。

QIAGENのDNeasy Plant Mini kitはすでに試していて、QIAGENのテクニカルサポートにも聞いてみました。
スケールダウンのことは考慮していないので濃度が測定できないくらいに薄いことが考えられるという返答でした。

数μg取れれば十分なのですが、濃度が測定されていなくても、PCRで確認するようにしてみます。

貴重なご意見ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.3807-3 - 2011/01/12 (水) 21:43:40 - 橘
そこからどれだけ取りたいのかが書いてないので何とも言えませんが、
SIGMA GenElute Plant Genomic DNA Miniprep Kit
QIAGEN DNeasy Plant Mini Kit
とかどうですか。
GenEluteの説明書では100mgの組織からの抽出量が載ってますが、はるかに微量でもPCRに使うくらいなら十分取れるはずです。
と言ってもおそらく良くて数ug程度ではないかと思います。
破砕処理をしっかりやりましょう。
10mgの組織から数十ug欲しいということだと、多分そんなキットはないのではないかと思います。

(無題) 削除/引用
No.3807-2 - 2011/01/12 (水) 21:06:41 - Actias
(1) YeaStar Genomic DNA Kit (ZYMO RESEARCH, Orange, CA 92867)
(2) MasterPure Yeast DNA Purification Kit (EPICENTRE Biotechnologies, Madison, WI 53713)
酵母だと、仰るような少量から取れます。

少量サンプルからのDNA抽出キット 削除/引用
No.3807-1 - 2011/01/12 (水) 18:47:03 - TMK
DNA抽出キットについての質問です。

今、植物カルスを培養し、そこからDNAを抽出しようと思っているのですが、カルスの生育が遅く少量のカルスからDNAを取らなければならない状況になってしまいました。

動物細胞や大腸菌をターゲットにしたキットはあったのですが、対植物で同じようなキットが見つかりません。

できれば、10mg以下の湿重量からDNAを抽出したいのですが、どなたかいいキットをご存じであれば教えていただきたいです。

よろしくお願いします。

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