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MALDI TOF MSのスタンダード トピック削除
No.3786-TOPIC - 2011/01/07 (金) 11:25:09 - bovine
MALDI TOF MS を用いてタンパク質実験を行っている学生です。

現在、MALDIを用いてタンパク質の分子量を測定しようとしています。
方法としてはSDS-PAGEによってタンパク質を分離して、切り出しおよび透析をした後に測定を行う予定です。

そこで、自身のサンプルを測定する前に実験系が働くかの確認をしようとスタンダードとなるタンパク質を探しています。



自身のサンプルが約15-20kDaなので、その辺りのタンパク質を探していました。(販売されてるMALDI用の分子量スタンダードは予算の関係で厳しいです)
その際、SDS-PAGEの際に用いている分子量マーカーがMALDIを行う際のスタンダードにならないかと考えました。


このようなことは可能でしょうか?
また、同じようなことを行ったことのある方がいらっしゃったらアドバイスなどいただけると嬉しいです。

また、何か不足している条件などがありましたらご指摘お願いします。


よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3786-2 - 2011/01/09 (日) 12:38:11 - NEM
SDS-PAGEのスタンダードにすでにSDSが入っているものは使用できませんが、研究室にあるタンパク質を使って、以下の点を注意すればよいと思います。
(1)SDSが含まれていないこと。
(2)測定したい目的タンパク質の質量をはさむこと。
(3)スタンダードに使用するタンパク質の正確な質量を計算すること(PAGEの概算の値はダメ)。

MALDI TOF MSのスタンダード 削除/引用
No.3786-1 - 2011/01/07 (金) 11:25:09 - bovine
MALDI TOF MS を用いてタンパク質実験を行っている学生です。

現在、MALDIを用いてタンパク質の分子量を測定しようとしています。
方法としてはSDS-PAGEによってタンパク質を分離して、切り出しおよび透析をした後に測定を行う予定です。

そこで、自身のサンプルを測定する前に実験系が働くかの確認をしようとスタンダードとなるタンパク質を探しています。



自身のサンプルが約15-20kDaなので、その辺りのタンパク質を探していました。(販売されてるMALDI用の分子量スタンダードは予算の関係で厳しいです)
その際、SDS-PAGEの際に用いている分子量マーカーがMALDIを行う際のスタンダードにならないかと考えました。


このようなことは可能でしょうか?
また、同じようなことを行ったことのある方がいらっしゃったらアドバイスなどいただけると嬉しいです。

また、何か不足している条件などがありましたらご指摘お願いします。


よろしくお願いします。

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