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抗原ー抗体切断 削除/引用 No.375-9 - 2009/04/24 (金) 10:54:15 - 抗原ー抗体切断 Tbさん ありがとうございます おもしろい知識でした

ちょいと余談ながら 削除/引用 No.375-8 - 2009/04/23 (木) 23:06:07 - Tb MACSビーズが出てくる前からDynabeadsというマグネットビーズによる細胞分離システムがありました。Dynabeadsは（当時）直径〜4 umと細胞サイズであり、それに対してMACS beadsは直径50 nmで登場しました。後発のMACSの売りは、ビーズが小さいのでFACSに影響しないということに加え、小さいから抗体による刺激がDynabeadsみたいにない、ということをいっていました。 つい先日、Invitrogen（Dynal社を後に合併）のセールスメールがきてましたが、逆襲に出てました。MACS beadsは（小さいから）endocytosisされて細胞内に残留してartifactを作ると。まあ、どっちもわかっているのか、ポジティブセレクションより、ネガティブセレクションのキットをラインナップを充実させてきてますね。 ちなみに、どうもMultiSort KitのMACS beadsはほかのビーズより大きいようで、endocytosisされにくくなっているようです。

抗原ー抗体切断 削除/引用 No.375-7 - 2009/04/23 (木) 18:00:47 - 抗原ー抗体切断 皆さん お忙しい中、色々とご教授くださり有難うございました トリプシンは興味深いです。一度試してみようと思います

(無題) 削除/引用 No.375-6 - 2009/04/23 (木) 16:08:27 - 通りがかり 過剰量の抗原ペプチドで競合というのはいかが？

(無題) 削除/引用 No.375-5 - 2009/04/23 (木) 15:30:44 - おお トリプシン処理とか、、、

抗体ー抗原切断 削除/引用 No.375-4 - 2009/04/23 (木) 10:16:47 - 抗原ー抗体切断 皆さん有難うございます ＦＡＣＳの際　抗原ー抗体反応で細胞を標識化した後　回収し、回収した細胞から抗体を取りさるのはどうも難しいようですね。ご回答くださった方の条件では細胞は死んでしまいますよね。 有難うございます

MACSの場合は無理だと思います 削除/引用 No.375-3 - 2009/04/23 (木) 01:18:49 - Tb MACSの場合は１）ビーズの抗体と細胞膜の抗原がヘビーにリンクしていること、２）自然と細胞は生きたままで回収したいという条件がつくでしょうから、非生理的バッファーは使えない、ということで無理だと思います。 例外としてanti-FITC MultiSort beadsは、抗体とビーズをはがす溶液がついてきますが、これもMultiSortビーズのみでしか使えないものです。

(無題) 削除/引用 No.375-2 - 2009/04/22 (水) 23:04:01 - CJ 一度くっついた抗体をはがす、という意味ですか？ 1.incubate the sections with 0.1M glycine-HCl (pH 2) overnight at RT. 2.wash the sections with PBS several times. 3.redo immunohistochemistry. この方法で失敗した蛍光免疫組織化学をやり直すことに成功したことがあります。

抗体ー抗原の結合を切断 削除/引用 No.375-1 - 2009/04/22 (水) 22:06:12 - 抗体-抗原切断 素人で申しわけないのですが、ＭＡＣＳや免疫染色の際、抗体ー抗原結合部位を切断（抗体と抗原の引き離し）はどのようにするのでしょうか？ 試薬等ご存知でしたら教えてください

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