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(無題) 削除/引用 No.369-2 - 2009/04/24 (金) 12:30:58 - subaru クルードサンプル中にビオチンや類似物質があると、Strep-Tactinレジンに競合結合してしまい、回収したいのStrepII-tag融合タンパクの吸着量が落ちることはあります。 strep-tag精製前のクルードサンプルにアビジンを添加して、先にビオチンを吸収させることで競合反応を回避できます。 あとは、精製BufferのpHに注意することでしょうか。 説明書に書いてあるようなことなので、もうお試しかもしれませんが。

strepタグ 削除/引用 No.369-1 - 2009/04/22 (水) 10:43:19 - カチョー 蛋白質の発現、精製でstrepタグシリーズ（strep、strep II、 One-STrEP）を使ったことがある方、経験談を教えてください。 私はN末strep IIタグを、C末Hisタグとともに用いてみました。目的蛋白質の発現が低い上に大腸菌内で切断されてしまうので、精製度の高い全長蛋白を得るため、最初はHisタグ、それからstrep IIタグによる精製を行ったのですが、どうしてもStrep-Tactinレジンへの結合が弱く、必要な量を得るには不十分で頓挫しています。 しかしながら、理想的にはたらくのであれば、非常に有効なタグだと思うので、効率を上げるのになんらかの良い方法があれば、と考えています。 よろしくお願いいたします。

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