RT-PCRに使うポリメラーゼについて質問させてください。
植物の培養細胞のRNAをcDNAにしたものをテンプレートに、ある遺伝子のRT-PCRを行っています。
ポリメラーゼはTaqを使いました。
予想される長さの位置にバンドが出たので、確認のためサブクローニングをすることになりました。
そこで、ポリメラーゼをEx Taqに変えてPCRを行ったところ、そのバンドは全く出なくなってしまいました。
使っているサーマルサイクラーは同じで、サイクル数を増やしてもバンドは出ません。
なにか考えられる原因と解決策はあるでしょうか。
よろしくお願いします。 |
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