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(無題) 削除/引用 No.3610-2 - 2010/12/03 (金) 18:39:54 - A あくまで想像の範囲を出ませんが、、、。 1時間静置は細胞がフラスコにくっ付いて安定するのを待っているので しょう。また何故overnightにしないかですがovernight後は幾つかの 細胞は分裂して増えているでしょうから1時間後とovernight後では細胞 数が異なっているのではないでしょうか。ウイルス感染時のウイルスの タイターと細胞数の割合は重要なファクターですから再現性が悪くなる のでは。どうしても気になるのであればまずはマニュアル通りにおこ なってうまく行くことを確認してから、比較実験されればいいと思い ます。個人的にはその時間を別の実験なりに使ったほうが有益だとは 思いますが。

Sf9にウイルス感染させる前に、室温に1時間置くのはなぜ？ 削除/引用 No.3610-1 - 2010/12/02 (木) 13:31:01 - ぽこ 教えてくださいm(__)m 最近バキュロウイルス発現系を扱いだした者です。 バクミドをSf9にcellfectin IIを利用してtransfection後、P1ウイルス液を回収しました。 titerを上げるため、P2ウイルス液を作製したいです。 そこでinstructionsを見ると、Sf9を2x10E6/wellで6 well plateにまくよう書かれてあり、 plating後、室温で1時間静置した後、ウイルスをかけて27度に移して48時間後回収せよとあります。 素朴な疑問で、なぜ、plating後１時間ですぐにvirusをかけるのでしょうか？ 例えば、plating後、27度でover night後のSf9にかけても問題ないのでしょうか？ つまらない質問で恐縮ですが、みなさまのご意見いただけますと幸いに存じます。

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