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(無題) 削除/引用 No.346-4 - 2009/04/19 (日) 21:34:12 - 初心者 １５％ Sucrose 液に沈むどころか浮かなかったので、何が悪いのか疑問に思っておりました。ご教示いただいたことを参考に様子をみたいと思います。有難うございました。

(無題) 削除/引用 No.346-3 - 2009/04/17 (金) 23:55:20 - 通りすがり 脂肪をトリミングしてあげないと浮いたままのことがあります。 臓器は切片作製前に細かく切っても構わないなら、小さく切ってしまうのも手段の一つです。（特に肝臓は潅流固定しないと組織像が悪くなると聞きます） 私は4%PFA 4℃　Overnight →　15% Overnight 4℃ →20% Overnight 4℃→OCTコンパウンド　です。 スクロース置換は氷の結晶を防止するためだったと思いますので、作製した切片をHE染色して試してみてはいかがでしょう。

(無題) 削除/引用 No.346-2 - 2009/04/17 (金) 21:29:22 - CJ 15%ってのはちょっと濃度が低いような気もしますね。それでうまく行っていればよいのでしょうが。私は現在は３０％のものを使っていますが、ラット脳で２日くらいで沈みますね。体積にもよりますが、大体２日も置けば十分でしょう。気の短い人はovernightでやっています（沈まなくても先に進めてしまう）。

凍結切片用組織の調整 削除/引用 No.346-1 - 2009/04/17 (金) 11:42:37 - 初心者 いつも大変お世話になっております。 今回初めて凍結切片を試みようとしています。 組織を４％パラフォルムアルデヒドで固定後（２日）、１５％ Sucrose 液に移したのですが、初めから沈んだままです。小腸だけが初め浮き、すぐに沈みました。知人によると、他の組織も今からしばらくすると浮き、その後沈むとのことでしたが、５時間後でも同じ状態でしたので　Over night にしています。通常はどのくらいで完了するものでしょうか？また、２，３日放置した場合、いつ浮いて沈んだのかわかりにくいかと思いますが、なにか他に適当な判断の基準はありますでしょうか？組織は、肝臓、小腸、筋肉、軟骨、卵巣です。どうぞよろしくお願いしたします。

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