Bio Technical フォーラム

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DNAを1本鎖にする方法 トピック削除
No.3448-TOPIC - 2010/10/31 (日) 03:12:13 - 茶色
PCR産物をゲルカットにより特異的なバンドのみを切り出し、1本鎖にしようと考えています。熱変性による方法を試してみようと思っているのですが、95℃2分→４℃という方法でよろしいでしょうか？

最適なプロトコルがありましたら、教えてください。
よろしくお願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.3448-2 - 2010/10/31 (日) 13:23:48 - おお
ま、いいかとおもいます。
水やTEでやるといいかとおもいます。
なるだけ急冷したいので、ひーとブロックか
沸いた熱湯にに付けておいて、
氷水を用意してすぐにほり込むのがいいかと思います。

９５度２分はDNAの長さにもよるかもしれませんが、
わたしならもうちょっと長くすると思います。

他の方法として水酸化ナトリウム溶液で一本鎖にする方法もあります。

DNAを1本鎖にする方法 削除/引用
No.3448-1 - 2010/10/31 (日) 03:12:13 - 茶色
PCR産物をゲルカットにより特異的なバンドのみを切り出し、1本鎖にしようと考えています。熱変性による方法を試してみようと思っているのですが、95℃2分→４℃という方法でよろしいでしょうか？

最適なプロトコルがありましたら、教えてください。
よろしくお願いします。
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