全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

解決しました 削除/引用 No.3418-4 - 2010/11/19 (金) 10:50:03 - むすくる 私のケースは、Zinc fixativeを使うことでうまく免染ができました。 ありがとうございました。

ありがとうございます 削除/引用 No.3418-3 - 2010/10/27 (水) 11:40:27 - むすくる APさん、ご助言ありがとうございます。 Carnoyなどもよく使われるのですね。 PEM bufferというのは初耳だったのですが、ネットで調べたところ 0.1M PIPES, 1mM EGTA, 1mM MgSO4 (pH6.9) というのが出ていたのですが、これでよいでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.3418-2 - 2010/10/26 (火) 17:14:14 - AP PFA固定が不適という抗体はあんまりないと思うんですが。ほかの固定ではダメでもPFAならいけるというパターンが圧倒的に多いような。 同じ4% formaldehydeのはずだからと、10% formalinを区別せずに使っているなら問題があることがあります。市販のformalin (ca. 40% formaldehyde)は、安定剤・重合防止剤としてメタノールが含まれていて、メタノール感受性の抗原（膜タンパク質など）が損なわれる可能性があるということは、よく言われます。 ほかに、4% PFA in PEM buffer, PLP, Carnoyなどもよく使います。

whole mount免疫染色 削除/引用 No.3418-1 - 2010/10/26 (火) 16:40:50 - むすくる メダカ胚のwhole mount免疫染色をおこなっています。 いつもは4%PFAで一晩固定をおこなっていますが、抗体によってはPFAは不可、と書かれているものがあります。 こうした場合、他にどのような固定法が考えられるでしょうか？ 私はマウス組織の凍結切片を作る場合には、１．凍結固定のみ、２．凍結固定後、切片をアセトン固定、３．凍結固定後、切片を-20℃メタノール固定などで対応していますが、whole mountの場合、アセトンでは組織の収縮が激しく適していない、という話を聞きました。 whole mountをよくやられる方、お知恵を貸していただければ幸いです。 宜しくお願いします。

全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---