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(無題) 削除/引用 No.3413-4 - 2010/10/25 (月) 19:41:12 - み 小難しいこと書く前に、 単にMCF7は不死化した癌細胞で、繊維芽細胞は初代培養というだけでは？ NIH3T3のような不死化した繊維芽細胞株ですか？

(無題) 削除/引用 No.3413-3 - 2010/10/25 (月) 18:52:30 - すず ~様 早速の投稿ありがとうございます。 難しくてちんぷんかんぷんです。 自分で調べてみて、それでも判らなければ再度質問させてください。 頑張ってみます。

(無題) 削除/引用 No.3413-2 - 2010/10/25 (月) 18:25:58 - ~ �@すでに６０回くらい分裂している繊維芽細胞だった �A継代回数とPDLの関係が分かっておらず、実は問題は起きていない �B血清のロットなど培地の条件が悪く、10回くらいしか分裂できなかった �@については、貴方がヒトの皮膚を刻んで樹立をしたわけではないでしょうから、貰った時点でのPDLを確認しておく必要があります。 �Aについては、もし何のことか分からなかったら、培養関係の実験書を読みましょう。 1/10で希釈していれば、10回の継代で30〜40PDL位に相当しますので、�@とセットであれば問題は起きていないのかもしれません。 �Bについては、ラボで血清のロットチェック等が行なわれているかと、どのようなチェックをしたのかを確認しましょう。

細胞分裂について 削除/引用 No.3413-1 - 2010/10/25 (月) 18:12:53 - すず 初心者です。 MCF7と言う乳がん細胞とヒト線維芽細胞を培養しています。 乳がん細胞は、10回ほど継代してもまだ増えてくれるのですが、 線維芽細胞が10回ほど分裂したら増えなくなりました。 教科書には50回程度分裂すると記載されていて何が悪かったか判らずにいます。 ヒト線維芽細胞をPBSで洗浄して、 トリプシン処理して剥がして、 遠心して上澄を取り除き、 新たにメディウムを加えてピペッティングして細胞数を数えて、 蒔きなおしています。 顕微鏡で見たときに細い線のようなものが見えたのでコンタミを疑っていますが、MCF7細胞でも線が見えたのでフラスコ上のホコリかと思っています。 何が原因で10回しか分裂しなかったら検討がつきません。 どのような原因が想定されますか？ 教えてください。よろしくお願いします。

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