Bio Technical フォーラム

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ターゲティングベクターのPGK-DTAが逆向きの意味 トピック削除
No.3408-TOPIC - 2010/10/25 (月) 05:46:46 - はじめ
皆様こんにちは

２つ質問があります

１つ目は、ターゲティングベクターにあるPGK-DTAの逆向きの意味を教えてください。

読んでいる論文（Matui M et al, PNAS, 2000)にChrm3KOマウスを作ったターゲティングベクターがあるのですが、

そこに(PGK-DTA cassette was inserted at the upstream end in the reverse orientation)と書かれていました。

ノックアウトマウス作成等で、検索してみましたが大まかな流れと、

PGKがプロモーターで、DTAがジフテリア毒素でありネガティブセレクション用に使われることは分かりました。


このPGK-DTA　cassetteが逆になっている意味はなんですか？

図をみてもPGK-DTAが上下左右逆になっています。



２つ目は、相同組換えによりWild type alleleがTargeted Alleleになるとこは分かったのですが、Wild type alleleが入ったTargeting Vectorはどうなるのですか？


大変初歩的な質問だと思いますが、よろしく御願いします。
　
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自己解決しました 解決済み 削除/引用
No.3408-2 - 2010/10/28 (木) 00:13:48 - はじめ
自己解決しました

ターゲティングベクターのPGK-DTAが逆向きの意味 削除/引用
No.3408-1 - 2010/10/25 (月) 05:46:46 - はじめ
皆様こんにちは

２つ質問があります

１つ目は、ターゲティングベクターにあるPGK-DTAの逆向きの意味を教えてください。

読んでいる論文（Matui M et al, PNAS, 2000)にChrm3KOマウスを作ったターゲティングベクターがあるのですが、

そこに(PGK-DTA cassette was inserted at the upstream end in the reverse orientation)と書かれていました。

ノックアウトマウス作成等で、検索してみましたが大まかな流れと、

PGKがプロモーターで、DTAがジフテリア毒素でありネガティブセレクション用に使われることは分かりました。


このPGK-DTA　cassetteが逆になっている意味はなんですか？

図をみてもPGK-DTAが上下左右逆になっています。



２つ目は、相同組換えによりWild type alleleがTargeted Alleleになるとこは分かったのですが、Wild type alleleが入ったTargeting Vectorはどうなるのですか？


大変初歩的な質問だと思いますが、よろしく御願いします。
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