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ありがとうございました。 削除/引用 No.34-3 - 2009/02/16 (月) 09:54:32 - sansan 答えていただきありがとうございました。 アンモニウムイオンにも気をつけたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.34-2 - 2009/02/15 (日) 13:18:12 - AP 50 mM を越えるNaClやKClは阻害性がありますが、それ以下なら阻害しないようです。 （阻害条件の記載有り） http://www.neb.com/nebecomm/products/productM0201.asp http://www.fermentas.com/catalog/modifyingenzymes/t4polynucleotidekinase.htm 蛇足ですが、 DTTや2-MEなどの還元剤がへたっていると活性が低くなるようです。 アンモニウムイオンは微量でも高い阻害性があります。PCR bufferにアンモニウム塩が入っているものがあるので、注意した方がいいですね。

NaCl でT4 kinaseが阻害？？ 削除/引用 No.34-1 - 2009/02/15 (日) 12:43:12 - sansan 現在ある条件下で反応後T4 kinase で合成DNAの5'をラベルし ようとしているんですが、うまくいきません。 考えられる理由としては反応系からのNaClの持ち込み ぐらいしか考えられないのですが。 最終濃度が25mM程度なのでkinaseに影響はないと思ったのですが。 どなたかT4 kinaseがNaClで阻害されるかどうかご存知の方が いらっしゃいましたらよろしくお願い致します。

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