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(無題) 削除/引用 No.3379-4 - 2010/10/19 (火) 21:23:25 - Actias そういえば酵母 (S. pombe) ベクターに有ったなぁ、とおもって、 あらためて見直しましたが、直ではありませんでした。 http://www.riken.jp/SPD/pDUAL_Gateway.html

(無題) 削除/引用 No.3379-3 - 2010/10/19 (火) 20:20:36 - とんた 大腸菌を宿主とした発現系の場合ですと， EGFPなどで試したことがあります． その場合，C末端へのHis-tagの連結による 発現量や，蛍光強度，構造安定性などへの影響は 全くみられませんでした． ちなみに， pET22bのXhoIサイトを用いてHis-tagを連結させました． つまり，スペーサー(？)としては，LEの2残基が追加された形です． 御参考までに．

(無題) 削除/引用 No.3379-2 - 2010/10/19 (火) 14:46:23 - おお GFPをタグにして他のタンパクとフュージンするというのがあるから、 そっちを参考にしたら。

Hisタグの影響 削除/引用 No.3379-1 - 2010/10/19 (火) 13:50:46 - 詰み GFPのC末端にPCRによってHisタグと制限酵素部位を導入しようと考えています。 そこで論文をいろいろ読んでいるのですが、GFPにHisタグをそのまま付けても問題ないでしょうか？ Hisタグは小さくて影響は無いと考えているのですが、ただそのような論文が見つからなくて。 だからグリシン２個もしくは３個のスペーサーでも導入しようかと考えています。

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