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IPS トピック削除
No.3357-TOPIC - 2010/10/14 (木) 14:21:21 - 初培養
現在、iPS細胞を培養しています。
フィーダー細胞としてMEFを使用しています。
5継代目まで培養を続けていますが、
顕微鏡で見たMEFの色が4継代目と比べ異なります。
通常、黒っぽく見えるMEFが白く見えます。

MEFの劣化でしょうか?

まだ培養初心者なのでどなたか回答よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3357-13 - 2010/10/15 (金) 16:47:52 - おお
代数をかかれても、紛らわしいですよね。MEFの代数かとおもってしまいます。
まず購入しているということなので、同じばっち(ロット)なんでしょうか。
同時に購入先と相談してみてもいいのではないでしょうか?
どれくらい持つとか色々情報を持っているかもしれません。

一番気になるのが、位相差のフィルターの具合でコントラストが付かず
明るく見えているだけかもしれないと言うことです。ディッシュの蓋に
水蒸気が付いた状態でもそう言う風に見えることがあります。

iPS細胞自体にあるいはそれを使った実験に支障が出ていますか?

(無題) 削除/引用
No.3357-12 - 2010/10/15 (金) 09:49:31 - sin
とくに再現性があるわけじゃないですよね。
培地の色は正常ですか?

顕微鏡の 削除/引用
No.3357-11 - 2010/10/15 (金) 01:10:42 - ami
偏光の設定が変わってたりして。

そういう話かもしれないし、近くにいる人じゃないと解決不能。

(無題) 削除/引用
No.3357-10 - 2010/10/14 (木) 21:59:58 - Actias
廊下に出て、たすけてくれ!と叫ぶ。

は、ジョークとして、見た目の話を見てない者に相談されても、きつい。

周りで、助けてくれる人を探して。

今日明日の喫緊の問題でしょ?

(無題) 削除/引用
No.3357-9 - 2010/10/14 (木) 15:39:40 - 初培養
若干、形態に変化が見られます。

(無題) 削除/引用
No.3357-8 - 2010/10/14 (木) 15:31:43 - g-aj
MEFのロットは4継代目と5継代目で同じものなのですよね?
遠心して落としているならわかると思いますが、
別段MEFは黒色の細胞というわけではありません。

色以外の細胞の形態等に変化はありませんか?
他の人が顕微鏡を使って、絞りやフィルターが
変更されているといったようなことはありませんか?

(無題) 削除/引用
No.3357-7 - 2010/10/14 (木) 15:23:07 - 初培養
MEFは、購入しているため使用する度に
解凍しています。

(無題) 削除/引用
No.3357-6 - 2010/10/14 (木) 15:20:12 - おお
5継代目ってフィーダーの代数じゃないってこと?
じゃあ、どうやってフィーダーを維持してるの。

(無題) 削除/引用
No.3357-5 - 2010/10/14 (木) 15:07:27 - 初培養
増えないと思って使用しています。

MEFを蒔き、翌日iPSを蒔き現在このような状況なので
気になっています。

(無題) 削除/引用
No.3357-4 - 2010/10/14 (木) 15:02:57 - おお
MEFは、マイトマイシン処理されたものを購入し利用しています。
それってふえるの???

(無題) 削除/引用
No.3357-3 - 2010/10/14 (木) 14:59:23 - 初培養
回答ありがとうございます。

MEFは、マイトマイシン処理されたものを購入し利用しています。

(無題) 削除/引用
No.3357-2 - 2010/10/14 (木) 14:50:11 - おお
若干丸みをおびて、光っているようなかんじなら増殖速度が
あがってきたのでは、、、でもフィーダーはマイトマイシン
とかでしょりするの?

IPS 削除/引用
No.3357-1 - 2010/10/14 (木) 14:21:21 - 初培養
現在、iPS細胞を培養しています。
フィーダー細胞としてMEFを使用しています。
5継代目まで培養を続けていますが、
顕微鏡で見たMEFの色が4継代目と比べ異なります。
通常、黒っぽく見えるMEFが白く見えます。

MEFの劣化でしょうか?

まだ培養初心者なのでどなたか回答よろしくお願いします。

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