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細胞培養装置の殺菌法に トピック削除
No.3325-TOPIC - 2010/10/08 (金) 14:53:59 - RAS
いつもお世話になっています.
細胞培養装置の殺菌法について質問です.

細胞を培養しているディッシュ中に,自作の単純な小型装置を沈めた状態で培養を続けたいと考えています.
器具の素材は工業用PETとPCで,それ自体の毒性は低いと思われます.

しかしいざ器具を沈めて培養を続けると,わずか1時間程度で細胞の半数が弱まり始め,翌日には全滅してしまいます.
器具は,
@手洗いAコンタミノンで洗浄B純水ですすぎCUV照射
をしていますがこれでは不十分でしょうか.

エタノール殺菌は,エタノールで細胞が死滅してしまいそうで行っていませんが,微量なら問題ないのでしょうか.

解決方法をご存知のかたがいらっしゃれば,ご教授いただきたいです.
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.3325-7 - 2010/10/08 (金) 18:52:11 - RAS
おお様,異伝子様,sin様

早々のご回答ありがとうございます.
非常に参考になりました.

洗浄は超音波洗浄機で入念に行っているため洗い残しはないと思っていましたが,アルカリで劣化することは完全に失念していました.

今後,いただいたアドバイスを参考に実験を続けていこうと思います
ありがとうございました.

(無題) 削除/引用
No.3325-6 - 2010/10/08 (金) 17:47:31 - おお
>とりあえず塩基性洗剤は避けたほうがよい気がします。

ああ、そうでしたか、、、
じゃあわたしの0.2N水酸化ナトリウムも撤回いたします。
洗剤をどうしても使うなら中性洗剤ですね。うすーいやつにひたしておいて、
泡切れご10回以上の水洗いですね。
エタノールを使うと、さらに洗浄できますから、アルコール殺菌のほうが
理にかなっているかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.3325-5 - 2010/10/08 (金) 15:53:49 - sin
PETはアルカリで腐食された気がします。
PCはPETよりも化学的安定性が低いはずで、Wikipediaにもアルカリで劣化するとありました。
とりあえず塩基性洗剤は避けたほうがよい気がします。

(無題) 削除/引用
No.3325-4 - 2010/10/08 (金) 15:46:40 - おお
>コンタミノンって何かと思って調べたらアルカリ性洗剤って書いてありますよ。
まあ懸念の一つではありますが、メディウムびんもアルカリ洗剤であらいますからね。

(無題) 削除/引用
No.3325-3 - 2010/10/08 (金) 15:38:49 - 異伝子
コンタミノンって何かと思って調べたらアルカリ性洗剤って書いてありますよ。

エタノールの心配より私はこっちの方がとても心配ですが、私だけ?

エタノールは乾燥させれば飛ぶし、それでも気になるのならその後滅菌の水や培地で洗ってから使えばよし。

器具の形状が分からないのでなんともいえませんが、エタノールの方がマシに思います。

(無題) 削除/引用
No.3325-2 - 2010/10/08 (金) 15:32:17 - おお
エタノールにとかした物質を細胞に添加することがあります。
そのばあい、0.1%以下を目安にすることが多いです。
なので、70%エタノールにひたして、その後培養用ベンチ
ないで、風乾すればよほど構造が複雑で内部にエタノール
が入り込んで出てこないとか言うことがない限りだいじょうぶです。

おしめしの方法ですが、問題はあまり感じません。しいていえば
コンタミノン(洗剤)が完全に落ちているかどうかです(とくに構造上複雑で液体が内部に溜りやすい場合)。
もし汚れがひどくなく水洗いでいいなら洗剤は使わなくていいとおもいます。
毎回よく水洗いして、UV照射あるいはアルコール殺菌で十分だと思います。
特に一度洗浄をコンタミノンを使用していますので。以降はもう必要ないかもしれません。
洗いがひつようなら、0.2Nくらいの水酸化ナトリウムを使うという手もあります。

構造上UVが入り込まないような場所がありそうなら、
エタノールのほうがいいでしょう。エタノールも追い出しにくいようなら、
エタノール処理後滅菌水で洗浄すればいいかとおもいます。

細胞培養装置の殺菌法に 削除/引用
No.3325-1 - 2010/10/08 (金) 14:53:59 - RAS
いつもお世話になっています.
細胞培養装置の殺菌法について質問です.

細胞を培養しているディッシュ中に,自作の単純な小型装置を沈めた状態で培養を続けたいと考えています.
器具の素材は工業用PETとPCで,それ自体の毒性は低いと思われます.

しかしいざ器具を沈めて培養を続けると,わずか1時間程度で細胞の半数が弱まり始め,翌日には全滅してしまいます.
器具は,
@手洗いAコンタミノンで洗浄B純水ですすぎCUV照射
をしていますがこれでは不十分でしょうか.

エタノール殺菌は,エタノールで細胞が死滅してしまいそうで行っていませんが,微量なら問題ないのでしょうか.

解決方法をご存知のかたがいらっしゃれば,ご教授いただきたいです.

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