Bio Technical フォーラム

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核への移行 トピック削除
No.3273-TOPIC - 2010/09/28 (火) 16:32:28 - いさん
いつもお世話になっています。

私は現在、ペプチドを用いた遺伝子デリバリーを行っているのですが、

顕微鏡を用いて、蛍光標識した遺伝子を確認したところ、核までは移行せず、

エンドソームにトラップされたままのようです。

そこで、

エンドソームから遊離させるためHA2サブユニット
もしくは
核移行シグナルNLSモチーフ

をペプチド配列に付加させたいと考えています。

今のところ、HA2サブユニットを考えているのですが、どちらがいいとかっていうのはあるのでしょうか?

NLSモチーフを付けてもエンドソームにトラップされたままだと意味ないと思うのですが。
 
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(無題) 削除/引用
No.3273-2 - 2010/09/29 (水) 05:04:41 - おお
核移行シグナルをつけるかどうかは、エンドソームから出てからの挙動で判断するべきなのではないでしょうか、、、
それとも膜をまたぐ効率を考えると低いので、エンドソームに蓄積しているように見え、いくらかはサイトゾルに放出されているはずで、それでもって、核にそれが観察されていないから
シグナルが必要という考えなんでしょうか。そのそもその導入されたタンパク質は生理的には核に存在しているものなのでしょうか、、

単純にはいつけましょうというアドバイスは現状でしにくいことがわかってもらえればと思います。

核への移行 削除/引用
No.3273-1 - 2010/09/28 (火) 16:32:28 - いさん
いつもお世話になっています。

私は現在、ペプチドを用いた遺伝子デリバリーを行っているのですが、

顕微鏡を用いて、蛍光標識した遺伝子を確認したところ、核までは移行せず、

エンドソームにトラップされたままのようです。

そこで、

エンドソームから遊離させるためHA2サブユニット
もしくは
核移行シグナルNLSモチーフ

をペプチド配列に付加させたいと考えています。

今のところ、HA2サブユニットを考えているのですが、どちらがいいとかっていうのはあるのでしょうか?

NLSモチーフを付けてもエンドソームにトラップされたままだと意味ないと思うのですが。

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