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マウス脾臓細胞からのサイトカイン放出 トピック削除
No.3257-TOPIC - 2010/09/24 (金) 14:59:08 - ばいよー
マウスのアレルギーモデルを作成し、脾臓細胞を培養し、刺激を加えてサイトカインの放出量をELISAで測定しています。
48WELLに10*７個／mlにして0.5mlまいています。

上清の取り方がよくわからないのですが、単純にWELL中から上澄みだけを取るのがよいのか、WELLからエッペンチューブに移して遠心分離するのがよいのでしょうか？遠心分離するとサイトカインも細胞と一緒に底に落ちてしまわないのか心配です。遠心分離が正しいのならどのくらいの回転数がいいのか教えてください。
　
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(無題) 削除/引用
No.3257-4 - 2010/09/28 (火) 22:07:25 - chloro
通常はsupのみの回収でよいです。

cellの密度の濃さには驚きました 笑

(無題) 削除/引用
No.3257-3 - 2010/09/25 (土) 13:21:39 - 774
いったい何Gで遠心するつもりですか・・・

両方 削除/引用
No.3257-2 - 2010/09/24 (金) 21:56:14 - ami
両方やってみればいいし、遠心の条件も検討すればいいと思いますが、、、細胞の密度は明らかに濃すぎ。

マウス脾臓細胞からのサイトカイン放出 削除/引用
No.3257-1 - 2010/09/24 (金) 14:59:08 - ばいよー
マウスのアレルギーモデルを作成し、脾臓細胞を培養し、刺激を加えてサイトカインの放出量をELISAで測定しています。
48WELLに10*７個／mlにして0.5mlまいています。

上清の取り方がよくわからないのですが、単純にWELL中から上澄みだけを取るのがよいのか、WELLからエッペンチューブに移して遠心分離するのがよいのでしょうか？遠心分離するとサイトカインも細胞と一緒に底に落ちてしまわないのか心配です。遠心分離が正しいのならどのくらいの回転数がいいのか教えてください。
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