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(無題) 削除/引用 No.3241-3 - 2010/09/21 (火) 13:21:33 - おお タンパクは上がってるの?

(無題) 削除/引用 No.3241-2 - 2010/09/21 (火) 13:06:51 - fish 低酸素用のインキュベーターでマウス繊維芽様細胞でHIf1aのmRNAを みたことがあります。 一般的にはHIF1aはタンパク修飾による分解でのregulationですが、 実際hypoxia responsive elementを自身のpromoterに有し、 mRNAも増加したと思います。 その時には、Glut1やVEGFの上昇に比し、Hif1aの上昇は 非常に弱かったです。1.2倍程度. また時間によっても、酸素濃度によっても変化するので、 どうしても見たい場合は、この辺をふる必要があると思います。

HIF-1αの発現の実験 削除/引用 No.3241-1 - 2010/09/21 (火) 12:39:22 - 大杉 HIF-1αの研究を行っている方の意見をお伺いいたしたく、今回投稿させていただきました。 現在私は癌細胞の低酸素条件下でのHIF-1αの発現の変化に対しての研究を行っております。私たちの研究室では低酸素用のインキュベーターを購入する資金がないため、アネロパックケンキ 5%というガス濃度調節剤を細胞と一緒にパックにいれて使用しております。 アネロパックケンキは1時間以内にO2濃度を1%以下、CO2濃度を5%前後にしますが、CO2濃度は約5時間後に徐々に低下してしまいます。アネロパックケンキで24H、48Hと細胞培養し、RT-PCRでHIF-1αの発現を調べています。HIF-1αは低酸素下で上昇するはずなのですが、何度やっても逆に低下してしまっています。HIF-1αのTarget geneであるGlut-1やVGRFは上昇するのですが、HIF-1αがうまくいきません。 どなたか同様な実験をやっておられる方いらっしいましたら、ご意見をお聞かせください。よろしくお願いいたします。

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