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(無題) 削除/引用 No.3216-4 - 2010/09/17 (金) 10:12:21 - おお メーカーが検証とかしてなくて、推奨していないけど実際やってみるとワークする という抗体はまあまああります。 特にIPとか。 今回の場合免疫染色で検出系が違うということですよね。固定などのプロセスが 一緒なら抗体はつきますから、検出は可能のような気がします。固定方法を 変更したい場合は１度ワークするか見てみる必要があるでしょう。 蛍光を使うことで幾らか感度が高くなるかもしれませんのでバックグランドがあがる 可能せいはあると思います。最適な濃度も変わってくる可能性もありますから。 HRPでTSAを使い蛍光というてもあります。普通の蛍光よりさらに高感度なので わざわざ使う必要はないとおもいますが、酵素抗体の反応で蛍光で検出できる ほうほうもあります。今回はその必要性は感じませんけどね。 あとは、蛍光で同じ抗体を使っている文献があるかサーチしてみてもいいかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.3216-3 - 2010/09/17 (金) 09:40:16 - TS まぁ大丈夫だろうと買ってしまうようなパターンだと思います。 さらに同じようなサンプルの状態で、酵素抗体染色で実績があれば、 全く問題ないと思います。 パラフィン切片でやるつもりで、メーカーの方も近い処理で抗体染色をしたことがあるとか。凍結固定切片でとか。 一次抗体の場合、一定の処理がされた抗原に対して、抗体が認識できるか、ですから。くっついてしまえば、二次抗体は蛍光だろうが、HRPだろうが関係ないはずです。

(無題) 削除/引用 No.3216-2 - 2010/09/17 (金) 02:55:19 - 通りすがり 　免疫染色において一番重要なのは一次抗体です。標識も含めて、２次抗体が問題になるケースは少ないです。(劣化は別にして) 　あまり気にせずに進めてよいと思います。酵素抗体法でうまくいって蛍光でうまくいかないというケースは考えにくいです。

蛍光免疫染色 削除/引用 No.3216-1 - 2010/09/17 (金) 00:57:36 - 免疫染色初心者 免疫染色初心者です。 ある組織中の細胞を染色したいと思っています。 使用する動物種及び、この細胞に特異性の高い一次抗体は手に入りそうです。 しかし、販売元に確認すると、この一次抗体は酵素抗体染色での使用実績はあるが、蛍光染色での実績はまだない・・・ということでした。 実績がないので推奨は出来かねると言われたのですが、 こういった場合でも蛍光染色は可能だと思われますか？ 実際、これまでに酵素抗体染色の実績はあるが、蛍光染色の実績はない一次抗体を用いて結果を出されたことのある方はいらっしゃいますか？？ 追記　この一次抗体が染色したい細胞に対して最も得意性が高いと思われます。 よろしくお願いします。

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