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(無題) 削除/引用 No.3212-5 - 2010/09/17 (金) 13:25:49 - おお フルオレセインはそれに対する抗体を使っうことがあると思いますが、蛍光を考えているのか抗原性を考えているのかで、そのアプローチの有用性が変わってくるかもしれませんね。 蛋白ラベル用のフルオレセインもありますので、そう言うのをつかえば、フルオレセインはインタクトにたもてるかもしれません。この時レジンはなにがいいかよくわかりませんけど。

レスありがとうございます。 削除/引用 No.3212-4 - 2010/09/17 (金) 12:58:53 - ユウ ＞笑い男さん レスありがとうございます。 トピを立ててからもう一度文献を調べてみたところ、同じようにFluoresceinを修飾しているものを見つけました。 なので、反応性の低下があるのかはよく分かりませんがひとまずやってみようと思います。

思い違いをしていました 削除/引用 No.3212-3 - 2010/09/16 (木) 20:20:46 - 笑い男 　アミノフルオレセインであるのを読んでなかった・・ 問題なく使えるかも知れませんね。 根拠は無いので申し訳ないのですが。 　カルセインとかでカルボキシル基を反応に 供したら、光らなくなったことはあります。 　タンパクラベル用の蛍光試薬（蛍光試薬にNHSが付いているやつとか）と アミノーセファロースみたいな組み合わせなら、ラベルしても光るとは 思いますが・・・・・ 　いやー、先は勘違いしてたので、言い訳がましくなってきたなー 　だれかー、間違ってたら指摘してください

経験は無いですが・・ 削除/引用 No.3212-2 - 2010/09/16 (木) 18:36:33 - 笑い男 　反応は進むと思います。 電子はリッチだし。 　ですが、結合したものが蛍光性を持つのかは？？？です。 だってフルオレセインのパイ電子雲が修飾することで変わるから。 フルオレセインの蛍光のｐH依存性なんて、アミノ基のチャージに 依存しているだろうし。 　NHS-セファロースを持っているのなら、少量で試してみる。 これから購入するというのなら、NHS−XX　の安い試薬 （ビオチン修飾用とかクロスリンカーとか、少量で金額が 張らないもの）を買って試した方が良いのかもと思います。 　経験者がコメントくれるといいですね。

活性化エステルとアニリンの反応 削除/引用 No.3212-1 - 2010/09/16 (木) 15:20:14 - ユウ sepharose beadsにfluoresceinを固定したいと考えています。 そこで活性化エステル（NHS-activated）付きのsepharose beadsとfluoresceinamineを反応させようと考えています。 NHSと第一級アミンが反応するのはわかっているのですが、ベンゼン環にアミノ基がついている場合でも問題なく反応するのでしょうか？ R-NH2とアニリンではアミノ基の電荷が異なるので疑問に思いました。 初歩的な化学の問題で恐縮ですが、よろしくお願いいたします。

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