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(無題) 削除/引用 No.3194-2 - 2010/09/15 (水) 00:32:08 - エンブリョー 抗体が薄くないですか？ 私は通常、1 ug/ulを100〜500倍希釈して免染できていましたよ。 少々昔のことなので少し自信がありませんが。 メーカーなどがわからないので詳細がわからんかったのですが、上の情報だけでぱっと思いついたことを書いてみました。 例えば胚と言っても幅広いです。 因に私にとっての胚は マウスの着床前胚です。 後はどうしてPBS/PVPでwashするのかが判りません。なにか特別な理由があるのであれば教えて下さい。

ヒストンの免疫染色 削除/引用 No.3194-1 - 2010/09/13 (月) 16:28:46 - 初心者 今、実験でヒストンのアセチル化部分の免疫染色をしていますが 全然染まらずに困っています。 手順として(ほとんど室温下での作業)、 胚をPBS(-)で洗浄 4%パラホルムアルデヒドで20分間固定 0.2%TritonX+PBSで30分間処理 1%BSA+PBSで200μg/mlを200倍希釈した一次抗体を4℃で一晩保存 洗浄後、100μg/mlを200倍希釈した二次抗体で2時間反応 PBS+0.1%ポリビニルピロリドンで洗浄後、 ヘキスト染色もしています。 ヘキストの方はよく見えるのですが、 免染の方は全く光らないです。 抗原の賦活化とが必要なのでしょうか。 よろしければ、知恵をお貸しください。

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