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DNA Sequencing Primerの精製度 トピック削除
No.3127-TOPIC - 2010/09/02 (木) 07:40:36 - 310
前回のご相談では、多くのご指導、ご情報をいただきありがとうございました。

昔はHPLC処理をしたプライマーでシークエンスしていましたが、今はどの程度の精製が必要ですか?

PCRに関していえば昔はカラム精製でしたが、今はオリゴ作製機の性能向上により脱塩のみで大丈夫と言われ、脱塩のみのプライマーを使用してますが、問題はありません。

今回はT7とM13Reverseを合成しようと思います。ちょっと前までは合成したものが割安だと聞いていたのですが、原罪はどうでしょうか?

ご意見ご情報をお待ちしております。
 
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No.3127-6 - 2010/09/03 (金) 02:00:38 - 310
皆様、ありがとうございました。シークエンスプライマーの精製は脱塩にします。

(無題) 削除/引用
No.3127-5 - 2010/09/02 (木) 18:52:47 - A
ここ1年で2つの会社に脱塩でオーダーしたプライマーを使い
シークエンスしましたが私も問題無しです。HPLC精製グレードを
使うのはQuickChangeで変異を入れる時に使うオリゴだけです。

(無題) 削除/引用
No.3127-4 - 2010/09/02 (木) 11:48:40 - Pumpkin
私も脱塩のものでしかやったことないですが、問題ないです。

(無題) 削除/引用
No.3127-3 - 2010/09/02 (木) 10:40:36 - ファング
個々の遺伝子にしか使わないカスタムプライマーはPCRグレードでシーケンスに
も使ってます。
でもメーカーによれば精製品のほうがキレイに読めたり長く読めたりするよう
ですね。ユニバーサルに使いまわすのは精製品でもいいと思っています。

(無題) 削除/引用
No.3127-2 - 2010/09/02 (木) 10:27:59 - み
脱塩のものでしかやったことないですが、問題ないです。

DNA Sequencing Primerの精製度 削除/引用
No.3127-1 - 2010/09/02 (木) 07:40:36 - 310
前回のご相談では、多くのご指導、ご情報をいただきありがとうございました。

昔はHPLC処理をしたプライマーでシークエンスしていましたが、今はどの程度の精製が必要ですか?

PCRに関していえば昔はカラム精製でしたが、今はオリゴ作製機の性能向上により脱塩のみで大丈夫と言われ、脱塩のみのプライマーを使用してますが、問題はありません。

今回はT7とM13Reverseを合成しようと思います。ちょっと前までは合成したものが割安だと聞いていたのですが、原罪はどうでしょうか?

ご意見ご情報をお待ちしております。

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