Bio Technical フォーラム

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封入体を変性させたあとに生じる沈殿の正体？ トピック削除
No.3092-TOPIC - 2010/08/26 (木) 10:25:39 - pET30b
大腸菌で発現させた組換えタンパクを封入体として回収する際，
ureaなどの変性剤で溶かすと思うのですが，
溶かしてover nightで寝かせた時に
チューブの底にたまる褐色の透明な沈殿は何が堆積したものでしょうか？

変性しきれていない封入体？
破砕されなかった菌体？

また，これは再度ソニケーションするなどして取り除くべきなのでしょうか？

ご経験者の皆さまにおかれましてアドバイスいただけたら幸いです．
よろしくお願いいたします．
　
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(無題) 削除/引用
No.3092-2 - 2010/08/26 (木) 21:49:10 - AP
変性剤をつかってもどうしても不溶物は残ります。なんであれ、その不溶物は不要物と考えてまず間違いないです。
上清だけ使えばいいでしょう。

封入体を変性させたあとに生じる沈殿の正体？ 削除/引用
No.3092-1 - 2010/08/26 (木) 10:25:39 - pET30b
大腸菌で発現させた組換えタンパクを封入体として回収する際，
ureaなどの変性剤で溶かすと思うのですが，
溶かしてover nightで寝かせた時に
チューブの底にたまる褐色の透明な沈殿は何が堆積したものでしょうか？

変性しきれていない封入体？
破砕されなかった菌体？

また，これは再度ソニケーションするなどして取り除くべきなのでしょうか？

ご経験者の皆さまにおかれましてアドバイスいただけたら幸いです．
よろしくお願いいたします．
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