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MACSカラムの再利用について トピック削除
No.3040-TOPIC - 2010/08/18 (水) 08:24:45 - EBE
よろしくお願いします。
過去トピックに同様のものがありますが、やや違う点をお尋ねしたいと思います。

過去トピックでMilteny社のMACSカラムの再利用が可能ということを知り試しています。

カラムを使用後、75%EtOHで5回フラッシュした後乾燥→オートクレーブしています。しかし、2度目の使用ではバッファーがカラムの金属部分に満遍なく行き渡らず、乾いたままの部分が残ってしまいます。平衡化の時にピストンを使ってフラッシュしてみても同様で、細胞液の通過も非常に遅く、途中で流出がストップしてしまうこともしばしばです。

掟破りの方法なんでしょうが、節約のために何とか再利用したいところです。うまく再利用されている方がいらっしゃいましたらよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3040-6 - 2010/08/19 (木) 00:48:53 - ami
原理的にAutoMACSカラム(何度も使える)と同じ保存法

安心

(無題) 削除/引用
No.3040-5 - 2010/08/19 (木) 00:10:20 - EBE
乾燥させてしまったら同じことですよね・・・。お恥ずかしいです。
ETOHをwashバッファーで置換する感覚ですね。ありがとうございました。

他にも方法をご紹介頂ける方がいらっしゃればお聞きしたいです。

(無題) 削除/引用
No.3040-4 - 2010/08/18 (水) 21:01:20 - ami
カラムの上が乾いたらカラム内は湿っていてもWash流して使用開始

平均8回

なるほど 削除/引用
No.3040-3 - 2010/08/18 (水) 09:19:42 - EBE
早速ありがとうございます。やはり空気抜きは必要ですか・・・。

自然乾燥でETOHを飛ばした後に使用ということですね。

ちなみに、何回くらい再利用されていますでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.3040-2 - 2010/08/18 (水) 08:43:31 - ami
カラムの上を3回すすぐ

100% EtOH 2回通す

プランジャーを押し込んで、カラムの出口を100% EtOHにつけた状態からプランジャーを戻して、100% EtOHを逆流させてカラムに満たす、何回か繰り返して空気を抜く

50mlチューブに、100% EtOHを満たした状態で保存

プランジャーだけオートクレーブ

MACSカラムの再利用について 削除/引用
No.3040-1 - 2010/08/18 (水) 08:24:45 - EBE
よろしくお願いします。
過去トピックに同様のものがありますが、やや違う点をお尋ねしたいと思います。

過去トピックでMilteny社のMACSカラムの再利用が可能ということを知り試しています。

カラムを使用後、75%EtOHで5回フラッシュした後乾燥→オートクレーブしています。しかし、2度目の使用ではバッファーがカラムの金属部分に満遍なく行き渡らず、乾いたままの部分が残ってしまいます。平衡化の時にピストンを使ってフラッシュしてみても同様で、細胞液の通過も非常に遅く、途中で流出がストップしてしまうこともしばしばです。

掟破りの方法なんでしょうが、節約のために何とか再利用したいところです。うまく再利用されている方がいらっしゃいましたらよろしくお願いします。

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