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human特異的な蛋白 トピック削除
No.2998-TOPIC - 2010/08/06 (金) 21:03:58 - 初心者
いつも参考にさせて頂いております。

ヒト由来の細胞をマウスとラットに移植する
実験を行うこととなりました。
それにあたり、マウス(ラット)に生着した
細胞群がヒト由来のものか、確認する必要が
あると考えていますが、上司よりその方法と
してヒト特異的な、つまりマウス、ラットで
発現していない蛋白を標的として免疫染色を
行うように指示されました。何か適当な抗体
を御存知でしょうか?
もしご存知でしたら御教示いただけたら幸い
です。大変初歩的な質問で恐縮ですが
よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2998-7 - 2010/08/09 (月) 11:54:05 - Boston
ヒト由来細胞が男性由来ならば、雌マウスに移植して、Y 染色体を in situ で検出。

前出のように、EGFP でラベルするのが一般的だと思います。

(無題) 削除/引用
No.2998-6 - 2010/08/08 (日) 09:05:25 - 初心者
さっそくのお返事ありがとうございます。
御教示頂いた通り、あらかじめGFPなどを入れておくのが
確実なように思われます。上司と相談し、実験計画を
立て直していきたいと思います。

ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.2998-5 - 2010/08/06 (金) 22:58:17 - Actias
逆のホスト特異的な抗体で染める裏実験もね。

抗体の特異性は、抗体カタログに記載されています。

ただし、書いてないから認識しない、というわけでもないですが。

(無題) 削除/引用
No.2998-3 - 2010/08/06 (金) 22:30:24 - A
うーんさんがおっしゃるように

>GFPとかLacZとか発現させておく

を使って移植した細胞であることを示したデータを何度か
見たことがあります。あと免疫染色でということですが
たとえヒト特異的な蛋白質があったとしてもその抗体が
他のマウスやラットの蛋白質を絶対に認識しないという
保証があるわけではありませんから予め移植する細胞に
何か発現させて見分ける方がより確実な方法だと思います。
もし現在の実験の目的がまず予備実験でいけそうかどうか
を確認するためならば免疫染色でも悪くないとは思いますが
その場合もうーんさんがおっしゃるように

>ヒト特異的な抗体で免疫染色すればいいのでは

で事足りるかと。

(無題) 削除/引用
No.2998-2 - 2010/08/06 (金) 21:10:23 - うーん
マウスやラットで発現していないものを探すのも手ですが、
ヒト特異的な抗体で免疫染色すればいいのでは?その抗体がラット等に反応しないことに信頼があればそれでもいいような。

あるいは、ヒトの細胞に細工をしておく。GFPとかLacZとか発現させておくものてかと。

human特異的な蛋白 削除/引用
No.2998-1 - 2010/08/06 (金) 21:03:58 - 初心者
いつも参考にさせて頂いております。

ヒト由来の細胞をマウスとラットに移植する
実験を行うこととなりました。
それにあたり、マウス(ラット)に生着した
細胞群がヒト由来のものか、確認する必要が
あると考えていますが、上司よりその方法と
してヒト特異的な、つまりマウス、ラットで
発現していない蛋白を標的として免疫染色を
行うように指示されました。何か適当な抗体
を御存知でしょうか?
もしご存知でしたら御教示いただけたら幸い
です。大変初歩的な質問で恐縮ですが
よろしくお願いいたします。

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