Bio Technical フォーラム

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IPして酵素の活性を調べてみる。 トピック削除
No.294-TOPIC - 2009/04/07 (火) 19:51:25 - 教えてください。
酵素を免疫沈降してきてその沈降物で酵素活性を測定している例とかご存知の方ありますか。クルードサンプルだと似たような酵素が他にもあるので、あるていど精製してから測定したいのですが。
　
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(無題) 削除/引用
No.294-3 - 2009/04/07 (火) 21:05:37 - IP
ありがとうございました。対象はkinaseではないのですが、kinaseでそういう実験ができるなら原理的にはいけそうなきがしますのでトライしてみます。

http:// 削除/引用
No.294-2 - 2009/04/07 (火) 20:35:20 - TK-1
シグナルトランスダクションの分野なら、tyrosine kinaseなどのin vitro kinase assayなどでよくやられていると思います。IPして、kinase bufferで洗って、GST-fusionの基質と32P-gammaATPを加えてって感じです。他の反応系ではどうか知りませんが、精製した基質と検出系があれば出来そうな気はします。

IPして酵素の活性を調べてみる。 削除/引用
No.294-1 - 2009/04/07 (火) 19:51:25 - 教えてください。
酵素を免疫沈降してきてその沈降物で酵素活性を測定している例とかご存知の方ありますか。クルードサンプルだと似たような酵素が他にもあるので、あるていど精製してから測定したいのですが。
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