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(無題) 削除/引用 No.2916-7 - 2010/07/23 (金) 00:49:10 - ES細胞免染初心者 >[Re:5] take_さんは書きました : > http://www.monotaro.com/p/3321/1473/ > です。 > もっとも、指摘があるように、たわみがでるかも。 > Take様 ご返答ありがとうございます。 ご丁寧にリンクも紹介して下さってありがとうございました。 熱でたわんでしまう傾向があるのを念頭に置きながら、使用の可否を検討していきたく存じます。 今回は素早い書き込みと丁寧なご指導本当にありがとうございました。 使用に当たって疑問などが生じましたらこのスレッドに再度書き込みを致しますので、その際はどうぞご教授宜しくお願い申し上げます。

(無題) 削除/引用 No.2916-6 - 2010/07/23 (金) 00:46:30 - ES細胞免染初心者 >[Re:4] あかねさんは書きました : > 高解像度での観察の場合はプラスチックのスライドはオススメしません。 > 検鏡している間に熱でプラスチックがたわんで、焦点がずれる傾向にあります。 > > それと、当方ではカバーグラスを0.1% ゼラチンでコートして、ES細胞が張り付いてくれています。 > ちなにみ、日本にいたときに同様の事をやろうとしたら、上手くいかなかった記憶があります。 > カバーグラスは使用直前に10分くらいコートしています。 あかね様 書き込み下さいましてありがとうございます。 カバーガラスに0.1% ゼラチンコートで張り付いたのですね。凄いです。是非その手法を真似させていただきたいと思います。 今は海外にいらっしゃるように御見受け致しますが、そちらでどのメーカーのカバーガラスをお使いでしょうか？名称や品番などを教えていただけたら早速試してみたいと思います。 ちなみに当方ではマツナミのカバーガラスを用いています。日本製ですので、そちらでお使いのものとは表面のコートなどが異なるものかと思われます。 以上どうぞ宜しくお願い申し上げます。

培養できるスライドグラス(プラスチック) 削除/引用 No.2916-5 - 2010/07/22 (木) 21:13:14 - take_ http://www.monotaro.com/p/3321/1473/ です。 もっとも、指摘があるように、たわみがでるかも。

(無題) 削除/引用 No.2916-4 - 2010/07/22 (木) 02:36:08 - あかね 高解像度での観察の場合はプラスチックのスライドはオススメしません。 検鏡している間に熱でプラスチックがたわんで、焦点がずれる傾向にあります。 それと、当方ではカバーグラスを0.1% ゼラチンでコートして、ES細胞が張り付いてくれています。 ちなにみ、日本にいたときに同様の事をやろうとしたら、上手くいかなかった記憶があります。 カバーグラスは使用直前に10分くらいコートしています。

(無題) 削除/引用 No.2916-3 - 2010/07/21 (水) 22:23:29 - ES細胞免染初心者 Take様 ご返答ありがとうございます。 解析法は、共焦点顕微鏡を用いております。 DIC画像は必ずしも必要とはしておりません。 仰っているマイクロチャンバーとは以下のようなモノでしょうか？ http://www.ekouhou.net/disp-fterm-4B065BC13-p7.html プラスチック製とのことですのでガラスに張り付かないES細胞も張り付き可能なのかも知れないですね。以後調べて検討してみたいと思います。 レーザー顕微鏡とのことですが、Take様が使われていたのは共焦点顕微鏡でしたか？ 以上宜しく御願い致します。

(無題) 削除/引用 No.2916-2 - 2010/07/21 (水) 20:54:11 - take_ 解析方法は何ですか？ DIC 像をあきらめてもいいなら、マイクロチャンバーって言うのでしょうか、スライドグラスに土手をつけたようなものが市販されています。 （以前使いましたが、今は手近にありませんので、正式名称が分かりません） スライドグラスとは言うものの、プラスチックの板です。 培養は土手付きで行います。 染色するときに、土手をはずすことができます。 染色処理後、カバーガラスをかけて顕鏡します。 レーザー顕微鏡でも使えます。

ES細胞の免疫染色法について。 削除/引用 No.2916-1 - 2010/07/21 (水) 17:05:55 - ES細胞免染初心者 　皆様初めまして。いつも勉強させていただいております。 　ES細胞免染初心者と申します。 　早速質問なのですが、最近ES細胞の免疫染色を始めました。困っているのはES細胞がこれまで扱ってきた3T3などとは異なり、カバーガラスに張り付いてくれないことです。我々の用いているES細胞はCGR8というFeeder freeの株です。通常の培養の際にはDishを1.0％ゼラチン処理することでDish底面に張り付いてくれるのですが、免疫染色をするためにカバーガラス上に生やそうとしても、ゼラチン処理をするだけではDishのように張り付いてくれません。これまでコラーゲンコートなどメーカーからのサンプル品をいくつか試したのですが、いずれも良い結果は得られませんでした。 　Feeder細胞としてMEFをカバーガラス上に生やしてからであれば、ES細胞もカバーガラス上に張り付いてくれ、免疫染色が可能なのですが、折角のfeeder free細胞なので、出来ればMEFを用いずに免疫染色したいと思っています。 　ES細胞（特にFeeder freeの株）の免染をされている方、あるいはされたことのある方、皆様もし良い商品や技術をご存知でしたら教えて下さいますでしょうか。 　以上宜しくお願い申し上げます。

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