Bio Technical フォーラム

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http:// 削除/引用
No.2882-2 - 2010/07/14 (水) 14:14:15 - TK-1
自然光下でコロニーが緑色に見えるほど、GFPが蛍光を発するんですかね。

そもそもBlue-white selectionなんておまけみたいなもので、それができるできないが大きな問題になるという認識自体を改めた方がいいと思います。

GFP融合ベクターの作製 削除/引用
No.2882-1 - 2010/07/14 (水) 13:41:08 - ライゲーションマスター
pAcGFP1というベクターのN末のマルチクローニングサイトに、

目的のタンパク質をライゲーションして、GFP融合タンパク質発現ベクターの作製を行っています。

ライゲーション後、エタ沈、形質転換し、IPTG/Xgal、Amp(+)LBプレートに播いてブルーホワイトセレクションで、セレクションしようと考えています。

そこで疑問に思ったのですが、蛍光タンパク質でブルーホワイトセレクションは可能なのでしょうか?

融合プラスミド→緑色のコロニー(GFPが発現するため)

セルフライゲーション→青+緑色のコロニー(GFPとβガラクトシダーゼが発現するため)

GFP融合タンパク質の発現効率が下がったら、白色のコロニーが出来ると思うのですが。

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