pAcGFP1というベクターのN末のマルチクローニングサイトに、
目的のタンパク質をライゲーションして、GFP融合タンパク質発現ベクターの作製を行っています。
ライゲーション後、エタ沈、形質転換し、IPTG/Xgal、Amp(+)LBプレートに播いてブルーホワイトセレクションで、セレクションしようと考えています。
そこで疑問に思ったのですが、蛍光タンパク質でブルーホワイトセレクションは可能なのでしょうか?
融合プラスミド→緑色のコロニー(GFPが発現するため)
セルフライゲーション→青+緑色のコロニー(GFPとβガラクトシダーゼが発現するため)
GFP融合タンパク質の発現効率が下がったら、白色のコロニーが出来ると思うのですが。 |
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